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API 4000 内部交流 北京协和医院 临床药理中心 王洪允 2005年4月 Outline 串联质谱技术的基本原理 API 4000 概述 …… API 4000主要先进技术 …… API 4000离子源 …… Analyst操作系统简介 API 4000 系统操作演示（赵芊） 串联质谱技术的基本原理 串联质谱的基本概念 质谱：根据物质的质荷比(质量/电荷)来进行定量、定 性的一种分析技术。 串联质谱：串联质谱是将两个以上的质谱串联在一起 形成的多级质谱。 类型：根据串联形式划分 ……空间串联：四极杆-四极杆质谱 、四极杆-飞行 时间串联质谱 、四极杆-离子阱等。 ……时间串联：离子阱，MSn等。 发展历史 1978年，Yost和Enke发明了第一台三级四极杆串联质谱。 1982年，PE Sciex 、Finnigan等公司开发并销售三级四极串联质谱。 1985年，Lee最早将三级四极串联质谱用于药物体内代谢物的研究。 现状 到目前为止，几乎所有质谱公司均开发或销售三级四极质谱。 混合型串联质谱是当前质谱技术的一个重要发展方向——Q-TOF，Q-Trap。 现有串联质谱 串联质谱基本原理 以三级四极杆质谱为例介绍串联质谱的工作原理 四极杆质谱 扫描方式 子离子扫描 母离子扫描 中性丢失扫描 多反应离子监测 ……多反应离子监测（MRM，SRM）是串联质谱定量分析的核心 技术 多反应离子监测 优点：具有高度的特异性和选择性，能有效减少或者消除杂质干扰， 提高信噪比。 HPLC-MS/MS分析条件的建立思路 API 4000 概述 API 40001性能指标 Q1 Mass Range: 5 to 3000 m/z Q3 Mass Range: 5 to 3000 m/z Dynamic Range : 1 to 4e6 cps Scan Speed: 2400 amu/s API 4000 主要先进技术 Turbo V型离子源 专利线性加速器技术（Linac），有效消除交互效应(cross-talk)，提高MS/MS检测速度快，可同时检测100对MRM离子。 高压聚焦、碰撞四极杆保证离子的最大传输率。 IDA（Information dependent acquisition），强大的数据获取和分析系统，自动获取大量有效信息 。 API 4000 离子源 Turbo V型 ……IonSpray（ESI） ……APCI ……APPI Turbo V型离子源 ……雾化效率高，灵敏度高。 ……即插即用型,ESI接口和APCI接口切换方便。 ……与HPLC匹配性更佳，最高流速可达3ml/min（IonSpray） IonSpray APCI APPI APPI原理： APPI中利用UV来产生能量，这与APCI使用电晕放电针不同。使用时，将添加剂（甲苯）与样品同时输入离子源，UV能量首先电离甲苯分子，甲苯产生大量的光离子，在溶剂中导致一系列离子－分子反应，最终使得目标化合物形成准分子离子［M+H］＋（质子转移）或［M］＋（电荷交换），或者［M-H］－（质子吸引）。 优点：比APCI更加适合非极性化合物。 缺点：所用添加剂具有一定毒性。 Analyst 操作系统简介 Configure Tune Acquire Explore Quantitate 参考资料 说明书 培训教程 API4000 SOP * * MS1 MS2 碰撞室 检测器 离子源 电离 气化 质量分析器 第一级质谱 第二级质谱 第三级质谱 理化性质： 白色颗粒状粉末；在水中微溶， 在沸水中易溶；不溶于无水乙醇、氯仿或乙醚等。 液-液萃取 固相萃取 其它，如去蛋白处理等 L-苏糖酸是一种极性很强的小分子有机酸 生物样品预处理 色谱条件 色谱峰型对称；保留时间合适； 与干扰物质分离 质谱条件 1）结构中含有羧基，采用负离子电离 2）定量测定采用MRM.ppt 注：APCI使用前需要预热30min，防止溶剂挥发物在喷针上沉积 即插即用型 * * *