合成培养基-于都中学.ppt

微生物基础知识 细菌的外形与大小 细菌：单细胞不分枝的原核微生物。 细菌细胞微小而透明，通常用适当染料染色后显微镜观察 细菌的构造 细菌细胞由外向里依次有鞭毛、菌（纤）毛、荚膜、细胞壁、细胞膜、细胞质，细胞质中又有液泡、储存性颗粒、核质等。 *细胞壁 结构特点：坚韧且有弹性 细胞壁有哪些功能？ ①固定细胞外形； 菌落： 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 真菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将真菌分为两大营养类型。 自养菌（autotroph） 异养菌（heterotroph） 腐生菌 寄生菌 大部分病原菌 朊病毒（蛋白质病毒） 选择培养基 鉴别培养基 　　是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。 　　 鉴别培养基（differential medium） 用于鉴别不同类型微生物的培养基。在培养基中加入某种特殊的化学物质，某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物，而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征性变化，根据这种特征性变化，可将该种微生物与其他微生物区分开来。 （1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。 （2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 （3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 （4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而在培养基表面形成单个的菌落。 将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱中，培养12h和24h后，分别观察并记录结果。 4.培养基的用途 液体培养基：增菌 固体培养基：纯化，增菌 半固体培养基：动力检测，保种 （二）无菌技术 1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。无论是随后将要学到的倒平板、平板划线操作，还是平板稀释涂布法，其操作中的每一步都需要做到“无菌”，即防止杂菌污染。只有熟练、规范地进行无菌操作，才可能成功地培养微生物。 无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开的，主要包括以下几个方面： 　（１）消毒定义： 　　利用较为温和的化学或物理方法，杀死物体表面或内部的部份致病微生物（不包括芽孢和孢子）的过程。 区分为高程度消毒（High-level Disinfection）、中程度消毒（Intermediate-level Disinfection）、低程度消毒（Low-level Disinfection）三种方式。 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 　　（2）灭菌的定义： 　　以化学剂或物理方法消灭所有微生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒，而达到完全无菌之过程。 灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。 低效消毒法 中效消毒法 高效消毒法 灭菌法 方法 定义 分类 无菌技术 杀灭一切微生物 物理法：热力、辐射、 微波、等离子体 化学法：醛类、烷化剂 杀灭一切致病微 生物 紫外线、含氯剂、臭氧、 复配剂等 杀灭除芽孢外的 致病微生物 超声波、碘类、醇类、酚类 杀灭细菌繁殖体、 亲脂病毒 单链季胺盐、双胍类、 中草药、金属离子 1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 …… (1)消毒的方法： 3.常用的消毒与灭菌的方法 1、灼烧灭菌 2、干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h。 3、高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min. (2)灭菌的方法： 最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。 有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只可让空气通过，而空气中的其他微生物不能通过。 而平皿是由正反两平面板互扣而成，这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。 微生物实验室培养的基本操