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BASi问题汇总： Q：较高的膜截留分子量（MWCO）对小分子物质的透析有影响吗？ A：一般情况下不会影响实验，除非有已知的某种较大分子对待测物有影响，需要将其排除在透析液之外。而对于液相分析来说，不同的物质有不同的洗脱时间，然而，偶尔也会出现共洗脱的情况。 MWCO是一个相对的东西。30kDa的孔径不代表30kDa的分子一定能通过，它还需要达到一个平衡和一定浓度。比MWCO小得多的分子可以很容易地透过膜，而较大的分子则不那么容易透过，因此小分子物质的回收率会比大分子物质高，那么它在透析液中的浓度会高一些。根据经验来看，透析液中有许多其他的分子的情况是很少出现的，而这种情况在研究外部药物时比研究神经递质时更常见。 Q：Empis的最长给药时间？ A：有很多因素影响，如药物作用、手术质量和动物的身体情况等等。单就机器本身来说，程序能设定的最长时间是10天，如果实验持续时间长于10天，那么可以在程序结束后再重新运行。 Empis程序可以选择开始时间和流速，之后你必须从剂量、总量或持续时间中选择一个，程序会获取动物的体重并计算出其他数据。 Q：Culex ABC的收集管中的抗凝剂有多少？当收集的样品很少的时候抗凝剂会不会比样品量还多？会不会对样品有影响？ A：如果用户买了预装抗凝剂的收集管（Greiner或Eppendorf），那么需要注意里面抗凝剂的量和浓度。一般来说预装的抗凝剂量非常少，不会对样品的分析有什么影响。如果自己装抗凝剂的话就需要自己根据实验调整用量。曾经有个例子，有位用户自己配的肝素，发生了溶血现象，后来发现是因为他把肝素的浓度配错了，高了100倍。 Q：采血最多能持续多长时间？ A：这很难回答。第一个因为它取决于导管状态。好的手术能够使动物保持该状态数周甚至数月，而新手的手术往往只能维持几天。另外的一个问题是动物能够连接在机器上多长时间。这取决于个体情况。就大鼠来说，公司做过持续数周的实验，但对于一些客户，他们只能让动物一次在系统里停留几天。这些都不要紧，在长时间不需要取血时可以将动物解下放回自己的笼子，然后需要时再连接——只要导管还能工作，并且将动物从机器上取下时使用封闭液封闭接头。 Q：如何选择微透析探针膜的长度？它与什么有关？ A：膜的长度与探针回收率有关。膜越长，回收率就越高。 所谓探针的回收率是指，从灌流液中流出的待测组分与浓度的百分老鼠血液含量约占体重5-8﹪（小鼠1.5-2.5 ml、大鼠15-35 ml）小鼠血量占体重的6%，或50-70m/kg。 每次最多采总血量10﹪，可产生最低的危害。 每天采血，最多可采1﹪采血占全血量的10%不会对机体造成严重的不良影响。3-4周后可以重新采集一次。特别注意的是：老年鼠血量降低。疾病会加重不良反应，所以必须考虑这些影响因素。采血后应补充体积的液体 动物品种最大安全采血量(ml)最小致死采血量(ml)小 鼠0.2 0.3 大 鼠1 2 豚 鼠5 10 兔10 40 狼 狗100 500 猎 狗50 200 猴15 60