天南星炮制减毒机理研究-中国试验方剂学杂志.doc

天南星炮制减毒机理研究(，赫炎2，付梅红1 (1 中国中医科学院中药研究所 北京100700) [摘要] 目的：研究天南星炮制减毒机理。方法：通过小鼠急性毒性实验和家兔眼结膜刺激性实验比较天南星生品、炮制品、针晶及不同化学提取部位的毒性采用炮制前后天南星饮片中特殊草酸钙针晶的变化情况，以及明矾所含相关离子对针晶的形态变化的影响。结果：急性毒性实验结果显示，天南星针晶组LD50为42.53mg/kg，生天南星粉末组LD50为1062mg/kg，天南星炮制品粉末组LD50为2788mg/kg。家兔眼刺激实验结果表明，生药粉组和针晶组表现出轻度刺激和中度刺激，而其它各种提取物均无刺激性反应。电镜观察发现，天南星炮制前后饮片中的针晶超微结构发生了明显变化，经KAl(SO4)2·12H2O、AlCl3溶液浸泡12h后，针晶尖端被破坏，而Na2SO4溶液浸泡后形态基本没有太大改变，尖端依然存在。结论：天南星针晶是产生刺激性毒性的主要，天南星针晶的刺激毒性与其结构形态有关，明矾炮制减毒的机制其Al3+加速破坏了草酸钙针晶的形态。 天南星为天南星科植物天南星Arisaema erubescens (Wall.) Schott.、异叶天南星Arisaema heterophyllum BI.或东北天南星Arisaema amurense Maxim.的干燥块茎[1]，具有“燥湿化痰，祛风止痉，散结消肿”之功效，主要用于顽痰咳嗽，风痰眩晕，中风痰壅，口眼歪斜，半身不遂，癫痫，惊风，破伤风等症[2]。天南星始载于《神农本草经》，列为下品，具有悠久的药用历史，是中医临床用于散结消痰、镇惊祛风的要药。 天南星历代文献均记载天南星有毒[3]，必须炮制后才能用于临床。新中国成立后历版《中国药典》均要求使用炮制品，而且用量一般较小，在3～9g。国家卫生部也将“天南星”列为28种“毒性药品管理品种”之一。对于天南星的毒性报道主要为生品口尝有麻舌感，主要表现为对粘膜的刺激性上，可致口唇肿痛、失音、流涎、痉挛、呼吸困难，甚至窒息死亡。 天南星的毒性究竟是什么毒、有什么表现？毒性成分是什么？天南星炮制后为什么可以大大降低其毒性？其炮制原理是什么？这些问题多年来一直是悬而未决的学术问题，同时也一直影响着天南星药材质量的控制、困扰着临床用药。 目前，国内外研究者提出一种假说，认为天南星科植物的主要刺激性毒性成分可能为其中所含的草酸钙针晶，由于其针晶形状与其它中药中所含的针晶针尖处形状不同，密布着细小的毛刺，这种毛刺对机体组织和黏膜能够产生强烈的刺激作用，从而使机体产生麻辣刺激感，导致口唇肿痛、失音、呼吸困难等。早在1924年，Herbert[]就在Science上报道了一些植物中草酸钙针晶具有刺激作用，并推测了其作用机制；1984年，日本学者Sakai也从草酸钙针晶的超微结构，阐述了草酸钙针晶的刺激作用[]。 针对上述假说，我们首先对天南星生品、生品水提物、炮制品及从生品中提取的针晶进行了小鼠急性毒性实验，并对天南星生品不同溶剂提取部位和针晶对家兔眼睛的刺激性作用进行了比较，初步确定天南星针晶为其刺激性毒性的主要物质基础。为了进一步说明天南星明矾炮制减毒的机理，我们利用扫描电镜，对炮制前后天南星饮片中的针晶及明矾对针晶单体作用前后其微观形态结构的变化进行了观察，确定了明矾中Al3+在炮制中的重要作用，初步阐释了炮制减毒的机制。 1 材料 1.1 药材：天南星药材2008年购于亳州药材市场，由河南中医学院陈随清教授鉴定为天南星科植物天南星Arisaema erubescens (Wall.) Schott的干燥块茎。 1.2 动物：昆明小鼠，雌雄各半，体重18-22g；大耳白兔，体重约3kg，雌雄兼用；购于北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证编号：京动许字SCXK（京）2009-0011号。 1.3 仪器与试剂：XS105DU 型电子天平(瑞士METTLER TOLEDO 公司)， HITACHI S-3400N型扫描电子显微镜（日本HITACHI公司）。各种化学试剂均为分析纯，北京化学试剂厂生产。 2 方法 2.1 样品制备 生品：天南星药材粉碎。 针晶：本实验室用石油醚法提取的天南星中特殊草酸钙针晶。 炮制品：天南星药材按药典法[1]炮制后得到制南星饮片，粉碎。 水提物：天南星药材粉碎过60目筛，加适量水，加热提取0.5h，提取2次，弃去滤渣，合并水提液浓缩至最小体积，得天南星水提物，备用。 小鼠急毒实验：以上四组样品均过160目筛，以生理盐水配制到适当浓度。 家兔眼刺激实验： 生品：生品过160目筛，生理盐水配置成均匀的混悬液，浓度为0.5g/mL。 针晶：过160目筛，生理盐水配置成均匀的混悬液，浓度为1%。 不同溶剂提取物：取5份生品粉末，过60目筛，各2