不同嫁接方法对甜瓜枯萎病抗性影响及其生理响应.doc

不同嫁接方法对甜瓜枯萎病抗性影响及其生理响应摘要：本文研究了插接、断根嫁接和靠接3种嫁接方法对甜瓜枯萎病抗性的影响。结果显示，3种嫁接方法均能显著提高甜瓜的抗枯萎病能力，但3种嫁接方法之间无显著差异。接种枯萎病菌后，嫁接苗根系活力、叶绿素含量、根系中SOD、POD、PAL活性显著高于自根苗，而MDA含量、相对电导率显著低于自根苗。以上结果表明，嫁接是提高甜瓜对枯萎病抗性的有效措施，但不同嫁接方法对甜瓜枯萎病抗性无显著影响；嫁接苗通过抗氧化系统和PAL活性的提高抵御了枯萎病菌侵染后所致的膜脂过氧化伤害，维持了根系和叶片的正常生理功能，从而提高了嫁接苗对甜瓜枯萎病的抗性。 关键词：甜瓜；枯萎病；嫁接方法；生理变化 嫁接换根使甜瓜接穗不直接接触土壤中的甜瓜枯萎病菌，对甜瓜的抗病生产具有重要意义，因而嫁接育苗在甜瓜生产中逐渐得到了推广。在生产实际中发现嫁接苗有时也会感染枯萎病而死亡，但原因究竟是由于枯萎病生理小种分化所致，还是嫁接方法不当所导致，目前尚无定论。此外，近年来断根嫁接育苗技术在甜瓜生产上已经得到普及，部分生产者担心断根嫁接后砧木所发生的新根可能对枯萎病抗性弱，由此对断根嫁接苗是否抗枯萎病提出了疑问。基于上述问题，本研究评价了不同嫁接方法对甜瓜枯萎病抗性的影响，分析了接种病菌后嫁接苗的生理变化，以期为甜瓜的嫁接栽培提供参考依据。 1 材料与方法 1.1 供试材料 供试接穗为伊丽莎白甜瓜（北京蔬菜研究中心提供），砧木为德高铁柱南瓜（德高蔬菜种苗研究所选育）。 供试甜瓜枯萎病菌菌株采自武汉市蔡甸区侏儒原种场田间的伊丽莎白甜瓜发病植株，由中国农科院郑州果树所古勤生博士课题组分离和鉴定。 1.2 试验方法 采用插接、断根嫁接和靠接3种嫁接方法，以自根苗为对照。插接和断根嫁接时，砧木比接穗早3 d播种；靠接时，接穗比砧木早5 d播种。靠接时分别在砧木子叶下1 cm（称为靠接苗1）和2 cm（称为靠接苗2）处进行。在甜瓜接穗子叶刚展开、砧木第一片真叶刚出现至半展开期间嫁接。嫁接后4 d，育苗棚严格密封，遮光、保湿，保持白天25℃、夜间20℃。嫁接后6 d，开始由小到大逐渐通风炼苗，逐步过渡到正常管理。靠接15 d时，切断甜瓜接穗的根部。 接穗长至2叶1心时，采用蘸根法用浓度为1×106个孢子/mL甜瓜枯萎病菌液进行人工接种，接种后将嫁接苗定植在营养杯中，每个处理接种30株，随机排列，设3次重复[1]。接种后10 d测定病情指数、发病率，并取样测根系活力，叶绿素含量，丙二醛（MDA）含量，相对电导率，POD、SOD、PAL活力和总酚含量。 病情调查分级标准：0级：茎基部无褐变；1级：茎基部褐变；2级：茎基部1/2处褐变；3级：茎基部2/3处以上褐变；4级：茎基部到顶端所有维管束褐变，根部坏死[2]。病情指数＝100×∑（各病情等级数×该病情代表数）/（最高病情等级数×调查总株数）[3]。 1.3 数据分析 用Excel 2003软件计算数据和作图，用SAS 8.1软件进行方差分析，并在5%水平采用Duncan’s新复极差测验进行多重比较。 2 结果与分析 2.1 不同嫁接方法获得的嫁接苗的发病情况 接种甜瓜枯萎病病菌10 d后观察发病情况，发现自根苗发病率达到73%（表1），而嫁接苗发病率为1%~2%，自根苗的病情指数为63，嫁接苗的病情指数为0.3~0.8。由以上结果可知，嫁接能够显著提高甜瓜对枯萎病的抗病性，而不同嫁接方法对提高甜瓜的抗枯萎病能力并无显著差异。 2.2 接种后根系活力和叶绿素含量变化 在接种病菌10 d后，自根苗根系活力下降很大，达71.86%，而嫁接苗根系活力并无显著变化（图1），不同嫁接方法的嫁接苗根系活力差异不显著。 接种病菌10 d后，自根苗叶片的叶绿素含量显著降低，减少了43.20%，而嫁接苗叶片的叶绿素含量无显著变化（图2），所以接种后嫁接苗叶片仍能维持正常光合特性。接种甜瓜枯萎病后，嫁接苗叶绿素含量显著高于自根苗，增加幅度在45.80%~67.71%，嫁接苗叶片维持正常叶色，而自根苗叶片褪绿、枯黄。不同嫁接方法处理下，接种甜瓜枯萎病对嫁接苗叶绿素含量无显著影响。 2.3 接种后MDA含量和相对电导率变化 在接种病菌10 d后，甜瓜自根苗根和叶片中的MDA含量均显著高于未接种病菌的植株，其中根和叶片中MDA含量分别增加了22%和52%（图3），说明甜瓜自根苗接种甜瓜枯萎病菌后其细胞脂膜过氧化严重。但不同嫁接方法处理下，嫁接苗接种甜瓜枯萎病菌后根系和叶片中的MDA含量并无显著差异，表明甜瓜枯萎病菌侵染后没有对嫁接苗根系和叶片造成显著的膜脂过氧化伤害。 接种甜瓜枯萎病菌10 d后，甜瓜自