基于hsps响应的氮胁迫下秀丽隐杆线虫的毒理效应(硕士答辩).ppt

（2）在氮肥的胁迫之下，hsp90缺失型秀丽线虫（JT6130）与野生型秀丽线虫（N2）相比表现出了极高的耐受性，而hsp90缺失型秀丽线虫（JT6130）在高存活率和正常头摆率之下，繁殖率反而很低。hsp70缺失型秀丽线虫（BC10067）在氮肥的胁迫下，存活率、头摆率、繁殖率三个指标与野生型秀丽线虫（N2）相比显著降低。hsp12.2缺失型秀丽线虫（RB2612）在氮肥的胁迫下，存活率和繁殖率这两个指标与野生型秀丽线虫（N2）相比差异并不明显，但是hsp12.2缺失型突变体（RB2612）的头摆率显著下降，这是因为hsp12.2缺失的表现为神经缺陷，这可能是其头摆率受到显著影响的原因。 （3）在研究氮肥与PH值对秀丽线虫的影响时，我们只选择了一种秀丽线虫即野生型秀丽线虫（N2）进行实验，野生型秀丽线虫（N2）生活最适的PH值为6.0-7.0，当PH值降低或升高时，线虫的存活率、头摆率和繁殖率均受到显著影响，可见野生型秀丽线虫（N2）对PH值的变化非常敏感。 （4）经过实验，我们筛选出了各类胁迫下的敏感型和耐受型线虫的hsps突变体，氮肥胁迫下hsp90缺失型秀丽线虫（JT6130）表现出了较强的耐受性，而hsp70缺失型秀丽线虫（BC10067）对于氮肥的胁迫较为敏感。并且氮肥胁迫下秀丽线虫的表现与HSPs蛋白表达相关性良好，进一步说明秀丽隐杆线虫具有成为氮肥农业污染及氮沉降污染生物标志物的可能。 （1）NO3－ 胁迫下野生型秀丽隐杆线虫体内HSP12.2、HSP70和HSP90蛋白表达有差异，高N胁迫下，HSP90表达量减低，表明N抑制了HSP90表达，hsp90缺失增强机体抗N胁迫的能力；HSP70表达量增高，N胁迫下，HSP70应激表达，增强了机体耐受性，hsp70缺失降低了线虫抗N胁迫的能力。sHSP（HSP12.2）在N胁迫下蛋白量表达无明显变化。hsp90和hsp70在氮胁迫下具有特异表现，hsp90起到负调控（negative）作用，hsp70呈现良好的氮胁迫响应关系。有待深入探讨hsp90和hsp70在氮胁迫下线虫应激耐受的信号调控通路。 6、讨论 （2）hsp70缺失型秀丽线虫（BC10067）在氮肥的胁迫下，存活率、头摆率、繁殖率三个指标与野生型秀丽线虫（N2）相比显著降低。这个结果也与免疫印迹Western blots检测的结果一致，HSP70表达量增高，N胁迫下，HSP70应激表达，增强了机体耐受性，hsp70缺失降低了线虫抗N胁迫的能力（图3-2）。hsp70缺失直接引发机体氧限制，氧途径障碍使得线虫对N胁迫的耐受性降低。HSP70现在被认为是一种抗凋亡蛋白，其作用机制比较复杂。 （3）在氮肥的胁迫下，hsp90缺失型秀丽线虫（JT6130）与野生型秀丽线虫（N2）相比表现出了极高的耐受性，这个结果与免疫印迹Western blots检测的蛋白水平变化相一致，在高N胁迫下，HSP90表达量减低，表明N抑制HSP90表达，hsp90缺失增强机体抗N胁迫的能力。而hsp90缺失型秀丽线虫（JT6130）在高存活率和正常头摆率之下，繁殖率反而很低（图3-3），这个结果与HSP90这种热应激蛋白的缺失可能有关，因此hsp90缺失型秀丽线虫的生殖能力会受到显著影响。hsp90缺失型突变体具有休眠的表型特征，进食量显著下降。减少进食会降低机体的代谢活动，而休眠会使机体进入一种高抗性、自封闭的状态，所以这种少进食、近休眠的突变体对氮胁迫表现出较强的抗性，而生命活动减弱也使得其繁殖能力降低。通过这种突变体，还可进一步探讨染毒受试体是否进食的争议。 （4）hsp12.2缺失型秀丽线虫（RB2612）在氮肥的胁迫下，存活率和繁殖率这两个指标与野生型秀丽线虫（N2）相比差异并不明显，但是hsp12.2缺失型突变体（RB2612）的头摆率显著下降，这个结果也在免疫印迹获得的HSP12.2蛋白表达结果相一致，免疫印迹结果显示HSP12.2在N胁迫下蛋白量表达无明显变化，但是hsp12.2缺失型突变体（RB2612）的头摆率显著下降，这是因为线虫hsp12.2作用于纤毛端的神经感受器（neural environmental sensory ）， hsp12.2缺失突变体表现为神经缺陷，导致行为活动异常，这可能是其头摆率受到显著影响的原因（图3-4）。 本论文工作得到了国家自然科学基金（批准号：1001339）和吉林省科技发展计划项目（批准号的资助。 7、资助基金及在学期间成果 王云彪，张雁慧，唐占辉，利用秀丽隐杆线虫休眠作为生物标志物甄别地沟油的方法（专利申请号：201210051560.0） 在学期间成果 资助基金 基于HSPs响应的氮胁迫下秀丽隐杆线虫的毒理效应 Toxicological ef