沙冬青抗寒基因的克隆功能分析与遗传转化研究作者刘美芹导师.doc

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2017-08-31 发布于天津
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沙冬青抗寒基因的克隆功能分析与遗传转化研究作者刘美芹导师.doc

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沙冬青抗寒基因的克隆功能分析与遗传转化研究作者刘美芹导师尹伟伦教授端扩增得到全长的类脱水素基因并进行了序列结构分析和功能预测经基因组扩增及序列分析发现该基因没有内含子杂交结果又表明基因在对照材料中几乎没有表达而在低温驯化植株中却有大量表达在驯化植株胚根中的表达量又明显高于子叶中的表达量可见的表达与沙冬青抗寒力的提高直接相关尤其是能提高较幼嫩脆弱的胚根的抗寒力为进一步鉴定的功能将分别连接到启动子和启动子下游构建双元表达载体并采用农杆菌介导的叶盘转化法转化烟草转基因烟草的基因组扩增及杂交分析均证明目

沙冬青抗寒基因的克隆、功能分析与遗传转化研究（作者：刘美芹，导师：尹伟伦教授’端RACE扩增，得到全长806bp的类脱水素基因AmCIP，并进行了序列结构分析和功能预测。经基因组DNA扩增及序列分析发现该基因没有内含子。Northern 杂交结果又表明AmCIP基因在对照材料中几乎没有表达，而在低温驯化植株中却有大量表达，在驯化植株胚根中的表达量又明显高于子叶中的表达量。可见AmCIP的表达与沙冬青抗寒力的提高直接相关，尤其是能提高较幼嫩脆弱的胚根的抗寒力。为进一步鉴定AmCIP的功能，将AmCIP分别连接到35S启动子和rd29A启动子（Prd29A）下游，构建双元表达载体，并采用农杆菌