一级菌种制作技术.ppt

（四）菌种分离的方法（常用三种） 组织分离法 将食用菌的部分组织移接到斜面培养基上获得纯培养的方法 简单易行 保持原菌种性状 适用于大型肉质子实体 重复多易退化 种菇选择→种菇消毒→切取组织块→移接组织块至斜面中央→培养 特点 概念 操作过程(以伞菌为例) 【2-2】 一级菌种制作技术 四、菌种分离及纯化 操作示范 选种菇 外观典型、大小适中、无病虫害、八成熟、第1~2茬的子实体 取组织块 取组织块：纵剖（撕）菇体，在柄盖交界处取绿豆粒大的组织 种菇消毒 用75%的酒精棉球擦拭子实体 接组织块 培养 移接至斜面中部 25℃培养箱 【2-2】 一级菌种制作技术 四、菌种分离及纯化 孢子分离法 概念 特点 操作过程 利用子实体产生的成熟有性孢子分离培养获得纯菌种的方法 属于有性繁殖，后代易发生变异，可用此法培育新品种 分离过程较复杂，适用于胶质菌类和小型伞菌 孢子的采集→孢子的分离→孢子的萌发 【2-2】 一级菌种制作技术 四、菌种分离及纯化 孢子分离法 多个孢子萌发后自由交配获得纯菌种的方法(较容易） 多孢分离 单孢分离 单个孢子萌发获得纯菌种的方法（难度较大） 整菇插种法钩悬法孢子印法 平板稀释法连续稀释法毛细血管法 【2-2】 一级菌种制作技术 四、菌种分离及纯化 基内菌丝分离法 概念 特点 适用 范围 从生长子实体的培养基中分离菌丝获得纯培养的方法 易感染杂菌 子实体已腐烂，但又必须保留该种菌种 子实体小而薄，用组织分离法和孢子分离法较困难 混合菌丝培养类型，如银耳，多采用此法 【2-2】 一级菌种制作技术 四、菌种分离及纯化 （五）菌种的纯化 纯化 概念 措施 是指对分离获得的菌种进行再提纯，成为生产所需要的菌种的方法 菌丝的再提纯 污染物的排除 正常的菌种在固体培养基上，菌丝逐渐向四周呈辐射状生长，边缘整齐一致，菌丝浓密健壮！ 【2-2】 一级菌种制作技术 四、菌种分离及纯化 五、出菇试验（鉴定） 是菌种投入生产前必须做的结实性鉴定试验 概念 进一步确定菌种，以避免菌种选育不当而造成不可估量的损失 目的 形态特征、生理特性、栽培性状、经济效益等 内容 【2-2】 一级菌种制作技术 五、出菇试验（鉴定） 鉴定程序 、 菌丝白、整齐、粗壮、有弹性、萌发快等 1.外观 好 差 菌丝干燥、收缩、自溶产生红褐色液体等 好母种 退化母种 【2-2】 一级菌种制作技术 五、出菇试验（鉴定） 2.鉴定 耐干湿性试验 接入母种→正常生长 原种培养基含水量 ＜50% ＞70% 耐高温性试验 仍正常生长 适温培养7天 30~35 ℃锻炼24h 再适温培养 【2-2】 一级菌种制作技术 五、出菇试验（鉴定） 出菇试验 栽培 出菇快产量高品质好抗逆性强 【2-2】 一级菌种制作技术 五、出菇试验（鉴定） 湖北三峡职业技术学院《食用菌生产技术》课程组 湖北三峡职业技术学院《食用菌生产技术》课程组 【1-1】 食用菌生产概况 食用菌生产技术 湖北三峡职业技术学院《食用菌生产技术》课程组 湖北三峡职业技术学院《食用菌生产技术》课程组 湖北三峡职业技术学院《食用菌生产技术》课程组 【单元2】一级菌种制作技术 《食用菌生产技术》 【模块2】食用菌菌种制作技术 湖北三峡职业技术学院《食用菌生产技术》课程组 【模块2】食用菌菌种制作技术 【单元2】一级菌种制作技术 一级菌种的制作流程 1 一级菌种培养基的配制 2 一级菌种培养基的灭菌 3 菌种分离及纯化 4 出菇试验（鉴定） 5 转管及培养 6 菌种保藏 7 一、一级菌种制作流程 一级菌种是第一次用孢子分离法、组织分离法或基内菌丝分离法获得的纯菌丝体及其经过转管扩大后的菌丝体。 一级菌种是菌种生产的基础，一级菌种质量的优劣，直接关系到二级菌种和三级菌种的质量，对食用菌生产产生根本的影响。 概念 【2-2】 一级菌种制作技术 一、一级菌种制作流程 制种流程 【2-2】 一级菌种制作技术 一、一级菌种制作流程 转管扩大 (原始母种) 一级菌种 培养 菌种分离 配制培养基 出菇试验(鉴定) 纯化(提纯) 灭菌 菌种保藏 扩制原种 1.一级菌种培养基基本要求 二、一级菌种培养基的配制 营养：必须全面且易于吸收 容器：玻璃试管（18mm×180mm或20mm×200mm） 斜面：平整光滑，既利于观察菌丝生长情况，又便于检查有无杂菌生长。 用途：主要用于一级菌种的分离、培养、提纯和保藏菌种等。 也可用培养皿或三角瓶作容器，制成玻璃平板培养基，主要用于菌种的分离、培养和提纯等。 【2-2】 一级菌种制作技术 二、一级菌种培养基的配制 【2-2】 一级菌种制作技术 二、一级菌种培养基的配制 PDA培养基 马铃薯(去皮 ) 200g 葡萄糖