分离提取微生物.ppt

神奇微生物之降解功能;在社会高速发展的今天环境污染已然成为一个我们必须面对的难题。例如芳香族化合物包括苯酚类及其衍生物和喹啉类等化合物，是工业废水中的主要的污染物。工业含芳香族化合物的废水大量排放给环境带来了严重的污染,该类化合物是原型质毒物,对一切生命个体都有毒害作用，其一旦进入人体,会引起人体的蛋白质变性和凝固。有害于人类健康及生物的生长繁殖,并且影响经济的可持续性发展。;那么，如何从自然界获得这种能降解芳香族化合物的微生物？;确定目的菌物 首先确定你所要筛选的目的微生物，本实验我们要从自然界中筛选分离能降解苯酚等芳香族化合物，例如高效降酚菌株JY03、石油降解菌A10、石油降解菌 B-5、嗜盐碱陈抟泛菌TJB5、苯酚降解菌ZJ-1、苯酚降解菌MW-1、苯酚降解菌NTZH-1、高效苯酚降解菌株XH-10等等。;特定环境采样 特定环境中采样，即要于可能存在此类微生物的环境中采集菌样。苯酚类化合物是有机合成的重要原料,是造纸、炼焦、农药和医药合成等行业生产的原料或中间体,大量用于制造酚醛树脂以及其他高分子材料、燃料等，所以可去炼油厂、造纸厂、医药厂等排放工业废水的环境中采集。本实验可于该环境中采取部分土样。;实验室中培养 采好菌物样品，拿回实验室，称取适量土样，加水，静置一定时间后再培养。首先进行扩大培养，就是把样品中所有的微生物都培养增殖，以获得更多的数量的细菌。一般就用全营养培养基进行培养。 ;筛选目标菌落 增殖结束后，取上清液稀释至不同倍数后，做平板单细胞培养。取合适梯度涂平板，按照自己要分离的菌选择培养基。本实验利用选择性培养基（selected media），以芳香族化合物如苯酚作为唯一碳源和能源物质进行筛选，即只有目标菌体才能利用该培养基中的能源物质。经过培养之后在培养基上找出生长旺盛的目标菌落。;重复培养纯化 在获得少量的生长良好的目标菌落后，多次重复以上步骤，进行再培养，继续进行选择性培养，筛选，把生长良好的菌体挑出来，在选择平板上，这样会得到一些单菌落，然后根据你的目的菌的??落形态和镜检分子特征选出某个单菌落，然后再次划线或者稀释梯度，进行纯化以及再纯化。同时也可以可以多挑选几支进行对比实验，以增加实验的科学性和准确性。 ;获得目的菌体 对不常见的或者难辨的目的细菌就要在微生物鉴定仪上首先鉴定是否存在这种菌 再进行科学研究和工业化生产，保证其科学意义。 ; 全球重大的石油泄漏事件盘点 1967年3月托利卡尼翁号油轮在英吉利海峡触礁使得所载11.8万吨原油全部流入海中，近140千米的海岸受到严重污染。受污海域有25000多只海鸟死亡，50%～90%的鲱鱼卵不能孵化，幼鱼也濒于绝迹。 1978年超级油轮阿莫戈·卡迪兹号在法国西北部布列塔尼半岛布列斯特海湾触礁，22万吨原油全部泄入海中。 1979年6月墨西哥湾“Ixtoc-I”油井发生井喷，一直到1980年3月24日才封住，共漏出原油47.6万吨，这是直至目前最严重的石油泄漏事件。 1999年12月，埃里卡号油轮在法国西北部海域因遭遇风暴而断裂沉没。2万多吨重油泻入海中，是法国遭遇的最严重泄漏石油污染海域事件。 2005年7月6日，一艘油轮与瓦尔河筑堤相撞，造成30多吨石油泄漏。 2006年3月10日在美国阿拉斯加该州北部海湾地区发生一起重大石油泄漏事故，超过1000吨（共6357桶）泄漏并污染了附近约84亩的苔原地带。这次事故造成了大批周围海洋生物及海洋大批死亡，附近的渔业损失近千万美元。 2007年11月10日晚，亚速海和黑海突起风暴，装载4700吨燃油的 “伏尔加石油139”号油轮断为两截，致2000 吨燃油流入海中。 2009年9月15日，因受台风巨爵袭击，一艘巴拿马籍集装箱船在中国珠海高栏岛水域搁浅，根据船方自报泄漏燃油50吨。; Make Presentation much more fun