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HPLC技术对细菌基因组DNA碱基组成的精确测定
2001年弟∞卷 化 学 学 报 V 59.200l
9 .1w ~l470 ^c1A(IHIMlCA SINICA No,9,1464~1470
HPLC技术对细菌基因组DNA碱基组成的精确测定
李越中 胡 玮 张禹清
张 勇 韩冠君 黎志风 王 冰
(山东大学生命科学院 微生物技术国家重点实验室 济南 250t00)
摘要 高教液相色谱技术(RPLC)在精确分析细菌基因组DNA碱基组成时存在着重复肚差和杂质干扰的问题 本研
究结合反相RPLC技术对化学啦解(高雾酸法和甲酸法)和生物酶水解(磷酸二酯酶I和牛肠粘膜碱性磷酸酶)DNA
的水解条件和产物进行了分析,建立了一套系统的丹析方法,改善了分析的重复性问题.排脒厂主要的误差来源,达
到丁对细菌DNA碱基组成精确分析测定的目的
关键词 高效渡相色谱,细茁DNA,碱基组成,化学水解,酶 解
Precise Determination of Base Composition in Bacterial
Genome DNA Using HPLC Techniques
LIYue—Zbong HUWei ZHANGh—Qing
ZI-IANG Yong HAN Guan—Jun LI Zhi—Feng WANG Bing
(State脚 lzdJoratoDofM6robi~ .Colllege rice.bandong Ln~rsit).~nan,~oltx))~ h j
Abstract Errors of repJxdudbility with high performance liquid chromatography(HPLC)am remarkably
~rious in detemunation of base composition of bacterial genome DNA,which is us.ally defined as guanine—
plus—cytosine content一 【G+CjmOl%J.Fo partially purified DNA,salts are a malUr~urce of inte renc
in enzyanatic degradation aM RNAs ale a maj~source oo f interference in chemicaldegradation This research
a~alyzes the conditions and products hy chemical(perehlorc acid and formic acid1 and erg}qnatic degradatioDS~
(phasphodiesterase I and bovine intestinal mucgYTt alkaline phophatase)of bacterial genoltle DNA using RP—
HPLC,and imroduces a systematic method to precisely lneasum the base eomposition of bacte aJ DNA
Keywords HPLC,bacterial DNA,base composition,chemical degradation.enzynmtic degradation
基于遗传物质而进行的分类是细菌系统分类 征 测定细菌(G+C)too
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