HPLC技术对细菌基因组DNA碱基组成的精确测定.PDF

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HPLC技术对细菌基因组DNA碱基组成的精确测定

2001年弟∞卷 化 学 学 报 V 59.200l 9 .1w ~l470 ^c1A(IHIMlCA SINICA No,9,1464~1470 HPLC技术对细菌基因组DNA碱基组成的精确测定 李越中 胡 玮 张禹清 张 勇 韩冠君 黎志风 王 冰 (山东大学生命科学院 微生物技术国家重点实验室 济南 250t00) 摘要 高教液相色谱技术(RPLC)在精确分析细菌基因组DNA碱基组成时存在着重复肚差和杂质干扰的问题 本研 究结合反相RPLC技术对化学啦解(高雾酸法和甲酸法)和生物酶水解(磷酸二酯酶I和牛肠粘膜碱性磷酸酶)DNA 的水解条件和产物进行了分析,建立了一套系统的丹析方法,改善了分析的重复性问题.排脒厂主要的误差来源,达 到丁对细菌DNA碱基组成精确分析测定的目的 关键词 高效渡相色谱,细茁DNA,碱基组成,化学水解,酶 解 Precise Determination of Base Composition in Bacterial Genome DNA Using HPLC Techniques LIYue—Zbong HUWei ZHANGh—Qing ZI-IANG Yong HAN Guan—Jun LI Zhi—Feng WANG Bing (State脚 lzdJoratoDofM6robi~ .Colllege rice.bandong Ln~rsit).~nan,~oltx))~ h j Abstract Errors of repJxdudbility with high performance liquid chromatography(HPLC)am remarkably ~rious in detemunation of base composition of bacterial genome DNA,which is us.ally defined as guanine— plus—cytosine content一 【G+CjmOl%J.Fo partially purified DNA,salts are a malUr~urce of inte renc in enzyanatic degradation aM RNAs ale a maj~source oo f interference in chemicaldegradation This research a~alyzes the conditions and products hy chemical(perehlorc acid and formic acid1 and erg}qnatic degradatioDS~ (phasphodiesterase I and bovine intestinal mucgYTt alkaline phophatase)of bacterial genoltle DNA using RP— HPLC,and imroduces a systematic method to precisely lneasum the base eomposition of bacte aJ DNA Keywords HPLC,bacterial DNA,base composition,chemical degradation.enzynmtic degradation 基于遗传物质而进行的分类是细菌系统分类 征 测定细菌(G+C)too

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