分光光度法快速检测细菌-分析化学.PDF

38 (FENXI HUAXUE) 4 第 卷 分析化学 研究简报 第 期 2010 4 Chinese Journal of Analytical Chemistry 573 ～ 576 年 月 DOI :10. 3724 / SP. J. 1096. 2010. 00573 分光光度法快速检测细菌 * 李冬阳 茹柿平 吴坚 应义斌 ( ， 310029) 浙江大学生物系统工程与食品科学学院 杭州 H O ， 。 ( 摘 要 采用分光光度法来检测完整细胞内 2 2 酶的活性 以实现细菌的快速检测 由于细菌 本研究以 E. coli DH5 ) H O ， H O ，H O H O ， α 为模型 内含有 2 2 酶 当往菌液中加入 2 2 时 2 2 会在胞内 2 2 酶的作用下分解 其分 。 H O 240 nm ， 解过程遵循一级动力学反应 通过测量该反应中 2 2 在 处吸光度的变化 可以得出该一级反应的 ， 。 : 4 . 2 × 10 － 13 L / (s ·cell)， 速率常数 从而获悉菌液的浓度 结果表明 大肠杆菌单位细胞浓度酶活为 其速率 5 . 7 × 106 ～ 5 . 7 × 107 cfu / mL ， 5 . 7 × 106 cfu / mL 。 常数与浓度在 范围内呈现良好的线性关系 检出限为 本方法 ， 5 ～ 10 min 。 是一种检测细菌总数的快速方法 测试时间为 ; ; ; ; 关键词 细菌检测 过氧化氢酶 酶活性 分光光度法 生物传感器 1 引 言 。 (CDC) ， 摄入含有细菌或细菌毒素的食品会引起细菌性食物中毒 美国疾控中心 估计 美国每年食 7600 ， 5200 ［1］。1999 ～ 2000 ， 源性致病菌的病例约 万 其中 例死亡 年 在我国东部部分地区发生了较大 规模的E. coli Ol57 ∶ H7 ， ［2 ］。 爆发 对我国经济造成了重大损失 解决由细菌性中毒引发的食品安全问题尤 。 ， 、 ， 为紧迫 然而 由于目前检测手段普遍存在耗时长 操作复杂和成本高等问题 严重制约了食品安全监控 。 ， 、 。 技术和管理体系的完善