半自动化细菌鉴定和药敏分析系统2．.PPT

学习目的与要求 * 细菌检验自动化技术的应用 熟悉微生物数码鉴定的原理和方法。 2. 了解半自动化、全自动微生物鉴定和药敏试验分析系统的基本原理和步骤 3. 了解自动化血液细菌培养系统的工作原理 细菌鉴定的技术近十几年得到了快速发展，从人工鉴定到自动化技术，细菌鉴定技术的发展经历了以下发展历程： 人工鉴定 培养基的微量化、标准化和商品化 数码分类鉴定技术（生化反应的数字化） 自动化鉴定技术（生物信息的电脑化） 使细菌的鉴定和药敏试验都实现了自动化。 一、微生物数码鉴定法 早在七十年代中期，一些国外公司就研究出借助生物信息编码鉴定细菌的新方法。这些技术的应用，为医学微生物检验工作提供了一个简便、科学的细菌鉴定程序，大大提高了细菌鉴定的准确性。 目前，微生物编码鉴定技术已经得到普遍应用，并早已商品化和形成独特的不同细菌鉴定系统。如API、Micro-ID、RapID、Enterotube和Minitek等系统。这种鉴定系统是自动化鉴定系统的基础。 数码鉴定 是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式，给每种细菌的反应模式赋予一组数码， 建立数据库或编成检索本。 通过对未知菌进行有关生化试验并将生化反应结果转换成数字（编码），查阅检索本或数据库，得到细菌名称。 其基本原理是计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。 (一)数码鉴定法基本原理 微量生化反应系统 Micro-ID系统 V P 硝酸 盐还原 ? 苯丙氨酸脱羧酶 硫化氢 吲 哚 鸟氨酸 赖氨酸 丙二酸盐 尿 素 七叶甘 O N P G 阿拉伯糖 侧金盏花醇 肌 醇 三 梨醇 4 2 1 4 2 1 4 2 1 4 2 1 4 2 1 — + — — + + + — — — + + + — — 0 2 0 0 2 1 4 0 0 0 2 1 4 0 0 2 3 4 3 4 相加所得数字：23434 查出相应细菌为：大肠埃希菌 先将细菌分离纯化。 做一个革兰染色。 根据染色结果选择不同的生化反应板进行接种（同一个鉴定系统，配有不同细菌的生化反应板）。 培养后，读取生化反应结果，得到一组数据。 将这组数据查编码本（即数据库），即得到鉴定结果。 （二）鉴定步骤： 国内的： 有河南开封医学生物研究所的肠杆菌科细菌鉴定卡E-15； 上海市卫生防疫站的发酵性革兰氏阴性杆菌鉴定系统SWF-A； 二、自动化的微生物鉴定和 药敏试验分析系统 细菌数码分类技术是细菌自动化鉴定技术的基础，细菌鉴定自动化是把生化反应数字化技术进一步电脑化，数据库用电脑管理，结果用电脑分析和鉴定。 鉴定系统的工作原理因不同的仪器和系统而异。不同的细菌对底物的反应不同是生化反应鉴定细菌的基础，而试验结果的准确度取决于鉴定系统配套培养基的制备方法、培养物浓度、孵育条件和结果判定等。 大多鉴定系统采用细菌分解底物后反应液中pH的变化，色原性或荧光原性底物的酶解，测定挥发或不挥发酸，或识别是否生长等方法来分析鉴定细菌。 1．VITEK-ATB半自动细菌鉴定和药敏分析系统 VITEK-ATB是生物-梅里埃公司产品。 由计算机和读数器两部分组成，计算机程序包括ATB和API的鉴定数据库、ATB的药敏数据库、数据储存和分析系统及药敏专家系统。 鉴定和药敏反应板在机外孵育后，一次性上机读取结果，由计算机进行分析和处理，并报告细菌鉴定和药敏结果。 (一)半自动化细菌鉴定和药敏分析系统 2．AutoScan-4半自动细菌鉴定和药敏分析系统 AutoScan-4是由Dade MicroScan公司(美国)生产。 由计算机和读数器两部分组成。鉴定和药敏反应板在机外孵育后，一次性上机，自动判读鉴定和药敏试验结果；亦可人工进行判读，将编码输入计算机，由计算机软件评定结果。有鉴定及鉴定药敏复合板两种测试卡。 （二） 全自动的微生物鉴定和