第六章 一般毒性2-2.ppt

食物利用率 动物每吃100g食物所增长的体重克数，表示为体重（g）/饲料（100g）。 喂饲染毒时，可计算实际染毒剂量。食物利用率可以鉴别动物体重降低是由于进食减少，还是受试物毒作用。 例如：大鼠喂饲溴甲烷熏蒸过的食物2个月，其体重平均增加156.6g，而对照组大鼠平均体重增加180.9g，虽然前者体重增加较慢，但接触组与对照组的食物利用率却基本相同（接触组为25.2，对照组为25.6），说明大鼠长期食用溴甲烷熏蒸过的食物，基本上不影响其对食物的吸收和利用，体重增长减慢可能是由于食欲下降或其它原因所致。 系统尸检和组织病理学检查 脏器称重和脏器系数（relative organ weight）：又称脏器相对重量，指脏器湿重与单位体重的比值，通常是每100g体重中某脏器所占质量，表示为脏器质量(g)/体重(100g)。 脏器适用于实质性脏器，包括：心、肝、脾、肺、肾、脑、睾丸、卵巢等。 脏器系数增大表示该脏器肿大，病变可能是增生、充血、水肿； 脏器系数减小可能表示脏器发育不良或萎缩等变化。 病理学检查：包括肉眼（大体）检查、病理切片检查、免疫组织化学检查、细胞超微结构电镜检查等，分别从大体、组织、细胞、亚细胞甚至分子水平等多个方面发现受试物的毒效应。 特异性指标 指可反映受试物对机体毒作用本质的特征性指标，常与毒作用机制有关，有时可作为效应生物学标志。 双（3，5-二特丁基-4-羟基苄磷酸单乙酯）镍盐，结构可分成三个部分：①二个分子的五价磷化合物，该部分有抗胆碱酯酶作用；②2，6-二特丁基酚的结构，可诱导微粒体酶活性；③作为一种有机镍或镍盐，可致皮炎及皮肤过敏。 可逆性观察 目的：了解毒性反应的可逆程度和可能出现的迟缓毒性 末次给药后24小时，每组活杀部分动物，其余动物停止染毒，继续观察2～4周，检测各项指标，重点观察毒反应器官。 指标观察时间 一般状况和症状，每天观察一次。 饲料消耗和体重，每周记录一次。 试验周期小于3个月的，末次给药后24小时和恢复期结束时各进行一次全面检查。 试验周期大于3个月的，可在试验中期活杀少量动物检测各项指标。 濒死或死亡动物应即时检查。 观察指标 慢性毒性作用 chronic toxicity 概念-慢性毒作用 指实验动物或人长期（甚至终身）反复接触外来化合物所出现的毒效应 时间:依受试物具体要求和动物种类定 大鼠1年 狗1-2年 如果与致癌试验结合进行，染毒期限最好接近或等于动物的预期生命 试验目的 观察长期接触受试物的毒性效应谱、毒作用特点、靶器官； 阐明受试物慢性毒性的剂量－反应（效应）关系，确定其NOAEL和/或LOAEL， 预测人群接触该受试物后可能发生慢性毒性的危险性，为制定人类接触的安全限量提供依据 实验动物选择和要求-慢性试验 　※两种实验动物：啮齿类，非啮齿类 　※ 要求为初断乳的动物，小鼠出生后3周，体重10?12g；大鼠出生后3?4周，体重50?70g 　※ 一般雌雄两性动物同时分别进行，各剂量组两性动物数相等。 　 实验动物选择和要求-慢性 　 　※　至少应设计３个染毒剂量组及１个正常对照组，必要时再加一个受试化合物的溶剂对照组 ，小动物每组40－60只，大动物每组８－12只，分组要随机化。如分批处死，试验结束时，每剂量组每性别的啮齿类动物不少于10只，非啮齿类动物不少于４只；动物同性别个体初始体重相差应不超过平均体重的20%。 　※　尽可能使用高等级动物，在符合国家实验动物要求的试验环境中进行 　※ 剂量设置原则为：足够高的剂量以能观察到受试物的毒作用、阐明毒性靶器官同时试验能顺利进行；有明确的剂量－反应关系，得到理想的LOAEL和NOAEL。 参考：亚慢LOAEL、LD50 剂量选择参考 以亚慢性阈剂量或其1/5-1/2剂量为慢性毒性试验的最高剂量，以这一阈剂量的1/50-1/10为慢性毒性的预计阈剂量，并以其1/100为预计的慢性无作用剂量组 以LD50为出发点，高、中、低三组分别为LD50的1/10、1/100、1/1000 剂量间距一般为2-4倍（不超过10倍），以利于得到剂量-反应关系，也有利于排除实验动物个体敏感性差异 一般来说，当预期受试物无明显毒性时，亚慢性和慢性毒性试验最高剂量(不进行体重和体表面积换算)设计为至少等于人拟用最大剂量的倍数是：保健食品应为100倍，中药为50倍，纯化学药品为30倍 当以不同的剂量依据设计与较长期结果不一致时，需要根据以往的经验判断，或增加剂量组以保证得到良好的剂量-反应关系。 试验期限-慢性 12个月染毒期 12个月染毒期+恢复期观察（28天）：观察受试物所致毒性的可逆性、持续性和迟发型 如最低剂量组或对照组存活动物数仅为开始