第六章_器官的培养.ppt

一般认为，矿质元素浓度高时有利于发展茎叶，较低时有利于生根，所以生根培养时一般选用无机盐浓度较低的培养基作为基本培养基。用无机盐浓度较高的培养基时，应稀释一定的倍数。如MS培养基，在生根、壮苗时，多采用1／2MS或1／4MS。 一般生根培养基中要完全去除或用很低的细胞分裂素。并加入适量的生长素，最常用的是NAA。一部分植物由于生长的嫩技本身含有丰富的生长素，因此也可以在无生长素的培养基上生根。 4.壮苗和生根 很多草本植物不定根的形成很容易，但木本一般较难，从成年树上得到的材料生根更难。对于这类生根较困难的植物，可试用以下几种方法：先用高浓度（100g／L左右）的生长素处理嫩茎几小时到一天，用无菌水冲洗后再接入到培养基中；如苹果、苹果砧木、梨等，可在生根培养基中加入适量的根皮苷或根皮酚以促进根的形成，浓度约为150mg／L。 4.壮苗和生根 在生根阶段，培养基中的糖浓度要降低到1.0％～1.5％，以促使植株增强自养能力，同时降低了培养基的渗透势，有利于完整植株的形成和生长； 另一方面应增加光强，达到33 00～10 000lx。在这样的条件下，植物能较好的生长，对水分的胁迫和对疾病的抗性将有所增加，植株可能在强光照下表现出生长延缓和较轻微的失绿，但事实证明，这样的幼苗，要比在低光强条件下的绿苗有较高的移植成活率。 4.壮苗和生根 是将第四阶段形成的小植株转移到土壤的过程，也是微繁殖中最关键的一步。 第一，应保持小苗的水分供需平衡，试管中的小苗，因湿度大，茎叶表面防止水分散失的角质层等几乎全无，根系也不发达，移栽后除了根系周围有适宜的水分供给外，还特别应保持空间的空气湿度，减少叶面的蒸腾。原则是在小苗移出的初期，外部温度条件要接近于培养瓶内，以后逐步向自然状态过度。这一工作又叫炼苗。 5．试管苗的移植 （炼苗） 第二，要选择适当的介质，关键是疏松通气和适宜的保水性，而且不滋生杂菌。常用的有蛭石、珍珠岩、粗砂、炉灰渣、锯木屑等，或将它们以一定比例混合应用，这些介质的选用要根据不同的植物种类而定。有些草本植物的无菌苗还可以直接移入保湿性良好的土壤中。 第三，要防止杂菌滋生，保持种植场内外干净。适当使用一些杀菌剂可以有效的保护幼苗，如百菌清、多菌灵、托布津等。 5．试管苗的移植 （炼苗） 第四，要注意光、温管理。试管苗移出后，尽量避免阳光直射，以强度较高的散射光为好，光线太强会使叶绿素受到破坏，叶片失绿，发黄或发白，使小苗成活迟缓。同时，过强的光刺激蒸腾加强。光照强度也可随移出时间的延长而增加。试管苗移植后温度要适宜，喜温植物 花叶芋、花叶万年青、巴西铁树等，以26℃左右为宜；喜凉的植物如马铃薯、文竹、菊花等以18～22℃为宜。温度过高，使蒸腾加强，并易滋生菌类；温度过低，幼苗生长迟缓，不易成活。 5．试管苗的移植 （炼苗） 除上面的措施之外，有时在试管苗移植之前先将培养容器的盖子打开或松动，使空气进入容器，待锻炼三四天后再移植，会得到好的结果。小苗移植后2～4周左右，即可长出根系和新叶，可逐渐通风锻炼，后将成活的幼苗移入田间。 5．试管苗的移植 （炼苗） 三、影响茎尖培养微繁殖的因素 1．基因型 2．外值体的大小 3．供试植株的生理状态 4．芽在植株上的部位 5．供试植株的年龄 6. 培养基 7. 褐变 三、影响茎尖培养微繁殖的因素 8. 玻璃化 9. 极性 10．后生变化 11．中间繁殖体的形态发生能力 12．遗传稳定性 第三节 叶的培养 一、叶原基培养 二、叶片组织的脱分化和再分化培养 离体叶培养是指包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶等叶组织的无菌培养。由于叶片是植物进行光合作用的器官，又是某些植物的繁殖器官，因此离体叶培养在植物器官培养中占有重要地位 离体叶培养 一、它是研究叶形态建成，光合作用，叶绿素形成等理论问题的良好方法 二、通过叶片组织的脱分化和再分化培养，以证实叶细胞的全能性。 三、通过离体叶组织、细胞的培养、探索离体叶组织、细胞培养的条件和影响因素，为叶片原生质体培养和原生质体融合研究提供理论依据。 离体叶培养理论和实践意义： 四、利用离体叶组织的再生特性，建立植物体细胞快速无性繁殖系，提高某些不易繁殖植物的繁殖系数。 五、叶细胞培养物是良好的遗传诱变系统，经过自然变异或者人工诱变处理可筛选出突变体而应用于育种实践。 离体叶培养理论和实践意义： 采用休眠期的顶芽，剥去一部分鳞片后，在5％次