植物组织培养-OK.PPT

3.1 培养基的种类 培养基成分的浓度表示 一般以质量表示（mg／L） 国际植物生理协会建议使用摩尔（mole）值: 大量元素、有机物质浓度用mmol ／L. 微量元素、激素、维生素等用μmol ／L 3.3 培养基选择 3.4 培养基的配制 第10届亚太兰花大会暨第20届中国兰花博览会 (2010 年 3月10-24号） 其中，16000平方米展场中，最抢眼的要数获得特别金奖的两大展品：一株名为‘素冠荷鼎’的莲瓣兰和一盆名为‘龙袍’的拱形大花蕙兰。‘素冠荷鼎’以1500万元的估价，一时成为展会的焦点。为一睹芳容，人潮纷纷涌来，独立展台周边一时人满为患。为维护秩序，主办方特安排了10名保安守护着展台。该展品由云南大理荡山州兰园选送，主人孙智勇介绍，‘素冠荷鼎’为莲瓣兰中的荷瓣矮种叶型草，有“小荷才露尖尖角”之韵，其将莲瓣、素心和叶型草三大特点集于一身，是该品种价格一直居高的缘由。另一个特别金奖由来自日本的亚太兰花大会基金会会长永田治彦选送，大花蕙兰‘龙袍’为黄花红心，花朵排列整齐，小花数多。 重庆市规模最大的一次兰花展24日落幕，不少兰友仍依依不舍，甚至留下了眼泪。随着兰博会谢幕，为防止境外外来生物入侵，此次来自境外日本、印尼等地的8000多株洋兰都不能再回到家乡。撤展后，这批洋兰将被集中进行烧毁。 据了解，在此次兰博会上获得“洋兰特别金奖”、号称价值数百万元的一盆蝴蝶兰也在销毁名单中。 蝴蝶兰离体快繁优化体系 蝴蝶兰性喜高温多湿、通风半阴的环境，需要的光照度是全日照的40%，相对湿度为70%，适宜温度为15-30℃。花期多在秋季，春、夏季也有开花的品种。繁殖方法可用无菌播种、组织培养和分株法进行繁殖。 蝴蝶兰是标准的附生植物，栽培时根部要求透气良好。盆栽用盆的底部一般要有个透气排水孔，脚部也要开有相应的透气缺口。可用特制的素烧陶盆或塑料花盆，也可用编织盆。因蝴蝶兰是气生兰，栽培基质不能用土，而以应用苔藓、碎砖粒、老树皮、棕树皮和椰壳纤维等为宜。 蝴蝶兰是单茎性气生兰,植株上极少发育侧芽,比其他种类的兰花更难进行常规无性繁殖。蝴蝶兰的组织培养技术相对较为成熟,许多国家已将此技术用于蝴蝶兰组培种苗的工厂化生产。但国内蝴蝶兰的种苗快速繁殖仍然以无菌播种为主,导致种苗个体间存在较大差异,成品蝴蝶兰花卉整齐度较差,严重影响蝴蝶兰的观赏性和商品价值。 外植体处理： （1）选择有花梗的无病虫害的健壮的蝴蝶兰为母株,于温室之中培养。在取材前7～8d停止浇水,喷施杀虫、杀菌剂1次,培养7～10d即可采用。 （2） 选取饱满、健壮、有腋芽的花梗,用剪刀从花梗基部切割,将切割的花梗用手术刀切成5～6cm的茎段,放入培养杯中带回实验室。 （3）先用自来水冲洗15min,之后用0.5%洗衣粉溶液浸泡10min,再用自来水冲洗干净。 培养条件　 试验材料均在植物组培室中培养,培养温度(25±2)℃,光照10～12hr/d,光照强度1600～2000lx。 诱导培养基： H+6BA12.0mg/L+NAA0.4mg/L+IBA0.4mg/L+CM100mL/L+柠檬酸50mg/L,pH5.4,H为花宝1号3g/L。 继代培养基： H+6-BA0.3mg/L+NAA0.2mg/L+CM100mL/L，此培养基成苗收获系数最大,是蝴蝶兰继代增殖和壮苗的理想培养基。 （4）将花梗切段,切口距芽2边各1.5cm为宜。将切割好的花梗节段,用0.1%的升汞消毒10min,取出并放于无菌切割纸上,用锋利的刀片剥去苞片,再用0.1%的升汞消毒8min,最后用无菌水冲洗5次。 （5）在超净工作台上将花梗节段的2边各切去约0.5～1.0cm,将节段基部向下斜插入诱导培养基中,每杯接种1个含芽节段,贴上标签。 (2) 改良怀特培养基 是1943年由White为培养番茄根尖而设计的。1963年又作了改良，称作White改良培养基，提高了MgSO4的浓度和增加了硼素。其特点是无机盐数量较低，适于生根培养。 200 Na2SO4 3 甘氨酸 0.001 CuSO4 5H2O 65 KCl 0.1 盐酸吡哆辛 0.0001 MoO3 16.5 NaH2PO4 4H2O 0.1 盐酸硫胺素 3.0 ZnSO4 7H2O 720 MgSO4 7H2O 8000 琼脂 0.3 烟酸 7.0 MnSO4 4H2O 300 Ca(NO3)2 4H2O 30000 蔗糖 100 肌醇 2.5 Fe2(SO4)3 1.5 H3BO3 80 KNO3 含量 其他 含量 有机物 含量 铁盐 含量 微量元素 含量 大量元素 166 CaCl2 2H2O 2 甘氨酸 0.8 KI 400 KH