动物细胞融合和单克隆抗体Ⅱ.PPT

1．(2013·海南卷)单纯疱疹病毒I型(HSV-1)可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HSV-1的单克隆抗体可快速检测HSV-1。 回答下列问题： (1)在制备抗HSV-1的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的HSV-1蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了________反应，再从小鼠的________中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的________细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是________。 (2)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的________中使其增殖，再从________中提取、纯化获得。 (3)通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSV-1蛋白，其原因是该抗体具有________和________等特性。 【解析】本题考查单克隆抗体的制备过程、单克隆抗体的特点。(1)给小鼠注射HSV-1蛋白后，小鼠体内发生体液免疫，小鼠血清中产生抗HSV-1蛋白的抗体。B淋巴细胞是从小鼠的淋巴器官中(如脾、骨髓、扁桃体、胸腺等)获取。杂交瘤细胞由B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而来，具有两个亲本细胞的特性：既能无限增殖，又能产生特异性抗体。(2)若想获得大量单克隆抗体，通常有两种方法：一是将杂交瘤细胞在动物细胞培养液中培养，然后从动物细胞培养液中筛选分离出单克隆抗体；二是将杂交瘤细胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖，然后从小鼠的腹水中提取纯化获得。(3)单克隆抗体具有：特异性强、纯度高的特点。 1．动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物细胞核移植、 、生产单克隆抗体等。其中动物细胞培养 是其他动物细胞工程技术的基础。 (1)过程 (4)核移植过程 1．植物组织培养过程涉及的生殖方式均为无性生殖。(×) 2．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞。(×) 3．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的。(×) (2013·浙江卷，6)实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如图所示。下列叙述错误的是(　　) A．甲过程需要对实验小鼠进行消毒 B．乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化 C．丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型 D．丁过程得到的细胞具有异质性 【解析】　本题综合考查了动物细胞培养相关操作过程和识记理解能力。A项中，动物细胞培养需要无毒、无菌的环境，甲过程指从实验小鼠身上取下皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒处理，故正确；B项中，乙过程表示将得到的皮肤组织分散成单个细胞制备成细胞悬液，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，故正确；C项中，丙过程表示原代培养，此时的细胞仍能保持正常的二倍体核型，故错误；D项中，丁过程表示通过选择或纯化从细胞系中获得具有特殊性质的细胞株的过程，细胞质有异质性，故正确。 1．两种技术手段培养过程中都进行了有丝分裂，都是无性繁殖，都可称克隆，都不涉及减数分裂。 2．植物组织培养最终产生新个体，体现了细胞的全能性；动物细胞培养产生大量细胞，不形成新个体，故不能体现细胞的全能性。 3．区分原代培养和传代培养的关键是是否分瓶培养。贴壁生长到一定程度需要用胰蛋白酶处理，然后再分瓶培养，原代培养结束，开始了传代培养。 (2013·全国大纲卷，2)关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是(　　) A．动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B．动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C．烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖 D．动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒 　(2014·苏北四市二模)下图为单克隆抗体制备流程示意图。 (1)单克隆抗体制备技术的基础是_____________。 (2)细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是 ________________________________________________________________________。 在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的________，以保证生命活动的正常进行。 (3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/mL，每孔滴入0.1 mL细胞稀释液，其目的是__________________ (4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是____________。 【解析】　(1)单克隆抗体利用了细胞融合和动物细胞培养的原理。(2)HAT是选择培养基，该培养基是为了将杂交瘤细胞筛选出来。(3)从HAT培养基