单侧肾切除及微渗透泵灌注血管紧张素II诱导小鼠-中国试验动物学报.DOC

单侧肾切除及微渗透泵灌注血管紧张素II诱导小鼠肾纤维化模型建立的研究 陈建1 曾莉1 陈刚1* 何立群1 （ 上海中医药大学附属曙光医院 上海 200021 ） 【摘要】将7BL/6小鼠随机分为正常组模型组生理盐水对照组[基金项目] 国家自然科学基金；上海市科学技术委员会科研计划项目（编号:11ZR1437700）；国家临床重点专科，国家中医药管理局重点学科；上海市中医药事业发展三年行动计划项目（ZYSNXD-CC-YJXYY）； [作者简介] 陈建（1987?），男，研究方向：中西医结合治疗慢性肾脏病的临床与基础研究。E-mail:163.com。 [通讯作者] 陈刚（1973?），男，研究方向：中西医结合诊治肾病的临床和实验研究。Email:163.com。 Keywords: Ang II; hypertension; renal fibrosis; hypertensive renal damage 肾脏是高血压病最重要、最常见的靶器官之一。长期的高血压可导致高血压性肾损害，特别是恶性高血压，如不干预最终将发展至肾功能衰竭。据文献报道，国内外由高压造成的肾脏损害进入慢性肾功能不全的患者人数呈逐年上升趋势1.1.实验材料 1.1.1.实验动物 选用鼠龄8c57BL/6小鼠36只，体重25±3g, 由上海斯莱克实验有限公司提供，SCXK( 沪)2012-0002。实验小鼠分笼饲养于上海中医药大学实验动物中心SYXK( 沪)2009 － 0069，温度25°、12 h 光照、45% 湿度的环境中，自由饮水，进食标准普通饲料，封闭管理。1.1.2.实验材料及药物 人血管紧张素Ⅱ (Ang)醋酸盐：Sigma公司生产；ALZET微渗透泵：Sigma公司生产。1.1.3.主要试剂 尿蛋白定量试剂盒、尿素氮试剂盒、肌酐试剂盒(南京建成生物工程研究所提供)。 1. 1.4 主要仪器 小鼠血压测定使用美国 Visitech Systems BP-2000 小鼠无创血压仪 。M5 型酶标仪(美国MD公司) ，GL－20G－II型高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂) 。MICROM HM 325 轮转切片机( 美国MD公司) ，Leica DMIL 倒置相差显微镜(美国莱卡公司) 。 1.2.实验方法 1.2.1分组： 将c57BL/6小鼠随机分为正常组模型组生理盐水对照组: 在造模4周后处死前一天用代谢笼收集实验各组小鼠的尿液测24小时尿蛋白定量。  血液: 各组实验小鼠，造模4周后处死，眶静脉采血待测。 肾脏组织：右肾组织用4％中性福尔马林固定，经脱水、包埋，切成2μm厚石蜡片作Masson、HE染色。1.2.4 观察指标及方法 造模前及造模后第2、4周无创血压仪测小鼠血压(每次每只小鼠测量10次取平均值）。 造模后4周后处死全部小鼠，眶静脉采血测Scr、BUN， 24h尿蛋白定量检测。用光镜观察Masson、HE染色肾组织病理变化。1.2.5 数据处理与统计分析计数资料用X2t检验，组间比较用方差分析。分析所得数据采用SPSS 15.0统计软件分别进行统计分析，P≤0.05将被视为所检验的数据有统计学意义, P≤0.01将被视为有高度显著性统计学意义。 2.结果 2.1造模前及造模后2、4周收缩压的比较 表1. 各组小鼠0、2、4周收缩压的结果（s） Table 1.the results of systolic blood pressure in each group of mice before the operation、2 and 4 weeks after the operation（s） ? 组别 造模前（mmHg） 造模后2周（mmHg） 造模后4周（mmHg） 正常组 103.92±20.28 117.08±22.37 120.10±10.67 生理盐水对照组 108.92±12.07 138.18±21.94*△ 128.50±23.88 模型组 98.67±14.67 159.73±22.01** 151.90±21.73** 与同期正常组比较*：P＜0.05，**：P＜0.01. compared?with the normal group in?the?corresponding period*：P＜0.05，**：P＜0.01. 与同期模型组比较△：P