布洛芬的含量检测.doc

布洛芬的含量检测 一 摘　要：建立了测定布洛芬含量的高效液相色谱法。选用Agilent Eclipse XDB－C8柱（4．6 mm×250 mm，5μm），LabAlliance C8保护柱（4．6 mm×10 mm），流动相为甲醇∶水＝75∶25，流速1．0 mL／min，检测波长220 nm，进量样20μL，柱温：室温。在10．0～400μg／mL浓度范围内，线性方程为A＝52．50 C＋50．79，相关系数0．999 9，回收率96．0％～100．7％，RSD0．65％～1．32％。该方法简便、准确、快速，可用于布洛芬的质量控制。 关键词：高效液相色谱；布洛芬；分析 　　布洛芬（ibuprofen）［（R，S）－2－（－4－异丁基苯基）－丙酸］是一种重要的非甾体消炎镇痛药物，临床应用较广。文献［1～3］报道了布洛芬含量的测定，流动相多用乙腈，在中华人民共和国药典［4］中布洛芬缓释胶囊含量的测定采用HPLC法，流动相也为乙腈，毒性较大，价格昂贵。本文用高效液相色谱外标法以甲醇∶水（75∶25）为流动相直接测定其含量，本法简便、快速、准确。适用于布洛芬缓释胶囊产品质量的控制分析。 1　实验部分 1．1　试剂与仪器　色谱纯布洛芬对照品（Fluka公司），布洛芬缓释胶囊（每片0．3 g，中美天津史克制药有限公司），超纯水，甲醇（HPLC级，天津四友生物医学技术有限公司），磷酸（分析纯，浙江建德化工厂）。Agilent1100高效液相色谱仪（HP1100系列四元泵，UV检测器，HP1100化学工作站），CQ－250S超声波清洗器（上海杰理科技有限公司），pHS－4型酸度计（杭州亚美电子仪器厂）。 1．2　标准溶液配制 　用0．2％磷酸准确配制每1 mL含布洛芬10 mg的储备液，然后用流动相逐步稀释至0．1，1．0，10．0，50．0，100，200，300，400μg／mL系列梯度标准溶液。 1．3　色谱条件 　色谱分离柱Agilent Eclipse XDB－C8柱（4．6 mm×250 mm，5μm）；保护柱Lab Alliance C8（4．6 mm×10mm）；流动相：甲醇∶水＝75∶25（含0．2％H3PO4 pH＝2．25），流速1．0 mL／min，紫外检测波长220 nm，进量样20μL，柱温：室温。样品色谱图见图1。 2　结果与讨论 2．1　pH缓冲液对测定的影响 　用0．02 mol／L的NaOH调节0．2％H3PO4为一系列的pH，实验结果表明随着pH的增加，峰形逐渐变宽，当pH在2．0～2．5的范围内，峰形最佳，但若酸性太强会影响色谱柱的使用寿命。故本文选用pH为2．25的H3PO4－NaOH的缓冲溶液和甲醇以75∶25的比例混合做流动相。 2．2　超声提取时间的选择 　实验表明，当超声提取时间少于20 min时，随着超声提取时间的增加，提取液中的布洛芬含量逐渐增加。当超声提取时间超过20 min后，增加超声提取时间，提取液中的布洛芬含量没有明显增加。这说明当超声提取时间超过20 min后，布洛芬提取较完全，因此，超声提取时间选用30 min。 2．3　辅料的影响 　称取布洛芬胶囊，置50 mL容量瓶中，加流动相超声溶解30 min。考虑到辅料在片剂中比例较大，采取滤除辅料杂质，然后进行色谱测定。结果表明，辅料对布洛芬胶囊含量测定无影响。 2．4　线性关系 　以峰面积对溶液浓度进行线性回归，得方程为A＝52．50 C＋50．79，相关系数为0．999 9（n＝6），线性范围为10．0～400μg／mL。经11次空白试验求得标准偏差，并用3倍的标准偏差除以工作曲线的斜率，求得本方法的最低检出浓度为CL＝3SD／K＝0．067μg／mL，即最低检测限为1．34 ng。 2．5　进样重现性试验 　以同一份对照品溶液，连续进样5次，按上述色谱条件测定含量，平均值49．4μg／mL，RSD为0．60％。 2．6　加标回收率试验 　精密称取3份已知含量（30．8μg／mL）的布洛芬样品3 mg各置于100 mL容量瓶中，分别加入精密称量的布洛芬对照品1．5，3．0，4．5 mg，用流动相溶解后稀释至刻度。测得回收率为96．0％～100．7％，RSD为0．65％～1．32％。 2．7　样品含量测定 　取布洛芬胶囊10粒，研匀。精密称取适量（相当于布洛芬5 mg）置100mL容量瓶中，加流动相超声溶解，过滤，滤液作样品溶液。另取布洛芬对照品，加流动相制成50μg／mL的溶液作对照溶液，按外标法定量计算其标示含量，结果（见表1）与中华人民共和国药典法［4］比较，两种方法测定结果基本相符。 3　结　语 　　实验表明，用高效液相色谱法对布洛芬胶囊含量进行测定，无需繁复的样品处理步