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猪A组轮状病毒Vp4全基因的克隆与序列分析
吉林农业大学学报2005，27(5)：549—553
JournalofJilinAgricultural
University
猪A组轮状病毒Vp4全基因
的克隆与序列分析+
王春凤7，于守平7，杨树宝2，李玉2”
331
摘要：应用RT—PCR技术，从猪A组轮状病毒总RNA中扩增了2bp的Vp4全基因，通过T—A克隆技
术，将PCR产物克隆至克隆载体pGEM—T中，转化至受体菌株JMl09中，通过质粒提取、限制性内切酶酶切、
酸序列，结果显示该实验株与黑龙江株和美国株的同源性最高，均达到99％以上，并具有轮状病毒vp4全基
因的抗原袁位区。
关键词：轮状病毒；vp4全基因；克隆与测序
中图分类号：$852．65 文献标识码：A 文章编号：1000-5684(2005)05—0549—05
and ofFull Geneof APorcineRotavirus
Vp4 Group
CloningSequencing
yu2
WANG Shu—ba01，LI
Shou—pin91，YANG
Chun．fengI，YU
Scienceand 18，Chi—
(1．CollegeofAnimal Technology，JilinAgriculturalUniversity，Changchun1．301
M；2．Institute 130118，China)
ofMycology，JilinAgriculturalUniversity，Changchun
of of ARotavimswere fromcell
Abstract：Thedeterminants
antigenic Vp4geneporcinegroup amplified
of
infectedwithmtavimsthereverse chainw_action(RT—PCR)．The
by transcripfion．polymerase length
full was2331 ofRT—PCRwere with and
Vp4gene bp．Theproducts ligatedplasmidpGEM—Teasy
to the ofrestrictionendonuclease and re-
transformed analysis cutting，PCRsequencing，the
JMl09．By
resultsofnucleotideandaminoacidse-
combinant wasconstructed．The
plasmidspGEM—T—Vp4
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