浙江中医药大学学生科研基金项目标书一份.doc

附件： 浙江中医药大学学生科研基金项目 申 报 表 （一式三份） 项目名称 microRNA在肿瘤多药耐药形成过程中的作用探讨 项目负责人 张副兴 专业年级 中医学七年制2008级 起止时间 2012.11-2013.11 浙江中医药大学 团委 科研处 项目名称 microRNA在肿瘤多药耐药形成过程中的作用探讨 项目类别 √1、自然科学类学术论文2、社会科学类社会调查报告和学术论文3、科技发明制作4、其他 申请资助金额 √1.资助项目：1500元； 2.立项项目 项目负责人 情 况 姓 名 张副兴 性别 男 出生年月 专业、年级 联系电话 项目组 成员情况 姓 名 性别 专业、年级 出生年月 联系电话 研究意义、国内外同类研究现状 （一）研究意义 肿瘤多药耐药(multidrug resistance, MDR)是肿瘤化疗失败的重要原因之一。MDR指除对诱导其产生耐药的药物产生抗药性外，对其他结构和功能存在差异的药物也可产生抗药性。MDR的机制较为复杂，主要涉及ATP结合盒（ATP-binding cassette transporters，ABC）转运蛋白超家族成员介导的药物外排、肿瘤细胞对凋亡的耐受、肿瘤微环境改变等{1}。越来越多的研究发现微小RNA(miRNA)与MDR高度相关。miRNA是一类长约21-25个核苷酸的单链非编码RNA，通过结合到mRNA的3非编码区(3’UTR),降解mRNA或者抑制其翻译过程，从而抑制转录后基因表达。miRNA通过对ABC 转运蛋白、细胞凋亡的调节等途径，使其与MDR形成了密切的联系。彻底探明microRNA在肿瘤多药耐药形成过程中的作用将有助于逆转剂的开发。 研究意义、国内外同类研究现状 研究意义、国内外同类研究现状 研究意义、国内外同类研究现状 研究意义、国内外同类研究现状 研究意义、国内外同类研究现状 研究意义、国内外同类研究现状 （二）国内外同类研究现状 1．基于ATP结合盒的MDR ABC转运蛋白是通过依赖ATP的药物外排泵、介导MDR的一类膜转运蛋白，ABC转运蛋白的异常表达导致MDR。人类49种ABC转运蛋白广泛涉及各种生理过程 [2]，其中至少15种ABC转运蛋白被证实与MDR相关[3]。 ABC转运蛋白根据序列和结构同源性，可分为ABCA～ABCG七个亚家族[4]。其中对ABCB1、ABCC1、ABCC2、ABCG2等研究较为透彻。 1.1 调控ABCB1的表达 ABCB1（multidrug resistance protein 1/P-glycoprotein，MDR1/P-gp，P-糖蛋白）是一种分子量为170KD的磷酸糖蛋白，属于ABC跨膜转运蛋白超家族一员，它可以转运包括药物、多肽、类脂等在内的数百种结构各异的复合物，从而影响药物的摄取和分布，是MDR经典机制之一[5]。Zhu等[6]首次报道了miRNA通过调控MDR1/P-glycoprotein的表达调节耐药性。作者发现MDR细胞株A2780DX5和KB-V中miR-27a和miR-451的表达量相对于其亲本A2780和KB-3-1显著上调。用miR-27a和miR-451反义核苷酸转染A2780DX5细胞后，P-gp和MDR1 mRNA的表达均降低。相反，拟miR-27a和miR-451寡核苷酸处理后却使A2870中MDR1的表达量增加。细胞对P-gp转运药物的敏感性和细胞内药物蓄积量在转染反义miR-27a和miR-451后均增加，从而证明miRNA通过MDR1/P-glycoprotein调节MDR。 1.2 调控ABCC1的表达 ABCC1(multidrug resistance-associated protein 1, MRP-1，多药耐药相关蛋白1)是ABC跨膜转运蛋白超家族一员，分子量190KD，在MRP蛋白家族中发现最早、研究最为深入[4]。Liang等[7]在探索miRNA是否参与对MRP-1的调节与影响肿瘤细胞对化疗药物的敏感性时，使用miRNA微阵列分析了miRNA在VP-16耐药细胞MCF-7/VP及其亲本MCF-7中的表达水平, 结果发现MCF-7/VP中MRP-1 mRNA和蛋白表达量增高，而MCF-7/VP细胞miR-326的表达量低于其亲本MCF-7。miR-326在一些晚期乳腺癌组织中也呈现低表达，且与MRP-1的表达量呈负相关。此外，提高miR-326的水平可使MCF-7/VP细胞MRP-1的表达量降低，同时使细胞对VP-16和阿霉素的敏感性