Elisa试剂盒人水痘带状疱疹病毒IgG(VZV-IgG).PDF

人水痘带状疱疹病毒IgG(VZV-IgG)Elisa 盒 人水痘带状疱疹病毒IgG(VZV-IgG)Elisa 盒说明书 人水痘带状疱疹病毒IgG(VZV-IgG)Elisa 盒仅供研究使用。 检测范围:96T 2pg/ml - 50pg/ml 使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及 相关液体样本中水痘带状疱疹病毒 IgG)含量。 实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标 本中人水痘带状疱疹病毒IgG(VZV-IgG) 。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原 ，往包被单抗的微孔中依次加入水痘带状疱 疹病毒IgG(VZV-IgG) ，再与HRP 结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经 过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转 化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的水 痘带状疱疹病毒IgG(VZV-IgG) 酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值) 通过标准曲线计算样品中人水痘带状疱疹病 毒IgG(VZV-IgG)浓度。 人水痘带状疱疹病毒IgG(VZV-IgG)Elisa 盒组成: 1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶 2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(96 pg/ml ) 0.5ml×1 瓶 3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份 5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张 6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个 标本要求: 1.不能检测含NaN3的样品，因NaN3 过氧化物酶的(HRP)活性。 2.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文 献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马 上进行试验，可将标本放于-20 避免反复冻融 操作步骤: 1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品 一支，用户可按照下列图表在小试管中进行 稀释。 48pg/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品 加入150μl 标准品稀释液 24 pg/ml 4 号标准品 150μl 的5 号标准品 加入150μl 标准品稀释液 12 pg/ml 3 号标准品 150μl 的4 号标准品 加入150μl 标准品稀释液 6 pg/ml 2 号标准品 150μl 的3 号标准品 加入150μl 标准品稀释液 3 pg/ml 1 号标准品 150μl 的2 号标准品 加入150μl 标准品稀释液 2.加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品 及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加 样50μl ，待测样品孔中先加样品稀释液40μ l ，然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度 为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟 。 4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀 释后备用 5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干 ，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此 重复5次，拍干。 6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl ，空白孔除 外。 7.温育：操作同3。 8.洗涤：操作同5。 9.显色：每孔先加入显色剂A50μl ，再加入 显色剂B50μl ，轻轻震荡混匀，37℃避光显 色15分钟. 10.终止：每孔加终止液50μl ，终止反应(此 时蓝色立转黄色)。 11.测定：以空白空调零，450nm 量各孔的吸光度(OD值)。 后15分钟以内进行。 操作程序总结：计算,以标准物的浓度为横坐 标，OD 线，根据样品的OD 浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度 与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式， 将样品的OD ，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 注意事项: 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15 -30 用完，板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在 水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其 准确性，以避免试验误差。一次加样时间最 好控制在5 排枪加样。 4.请每次测定的同时做标准曲线，最好做复 孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 于标准品孔第一孔的OD值) 液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计算时请最 后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染 。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行，