儿童病毒性腹泻的试验室诊断-中华医学会.DOC

儿童病毒性腹泻的实验室诊断 广州市妇女儿童医疗中心检验科 周珍文 摘要：儿童病毒性腹泻为常见病、多发病，是儿童主要致死因素之一。轮状病毒、诺如病毒、札如病毒、肠道腺病毒、星状病毒感染为儿童病毒性腹泻的主要原因。儿童致泄病毒的实验室诊断的传统方法有电镜检测法、病毒培养法、免疫检测法等。电镜法技术要求高，病毒培养法耗时长，敏感性低，免疫金标及ELISA简单、快速，但其敏感性及特异性不及新兴的分子生物学方法， 荧光定量PCR及基因芯片等分子生物学诊断方法为病毒性腹泻实验室诊断的发展方向。 关键词：儿童；腹泻；病毒；实验室诊断 Laboratory diagnosis of children viral diarrhea Abstract: Viral diarrhea in children is a common and frequently occurring disease, is one of the leading causes of children mortality. Rotavirus, norovirus, sapovirus，enteric adenovirus, astrovirus infections are main causes of viral diarrhea. The laboratory diagnosis methods for viral diarrhea include electron microscope method, virus culture method, immunoassays, molecular biology methods, et al. Electron microscope method need sophisticated technical requirements, the virus culture method is time consuming and low sensitivity, colloidal gold method and ELISA are simple, fast, however, their sensitivity and specificity are lower compared with emerging molecular biology methods, the molecular biology method such as fluorescent quantitative PCR and gene chip is the development direction for viral diarrhea laboratory diagnosis. Keywords: children; diarrhea; virus; laboratory diagnosis 腹泻是儿童的常见病和多发病，其中感染性腹泻为全球5岁以下儿童的第二大致死因素[1-2]。病毒为引起婴幼儿感染性腹泻的主要病原，其次为细菌、寄生虫、真菌等[3]。现发现的病毒性腹泻主要病原有轮状病毒（rotavirus）、诺如病毒（norovirus）、札如病毒(sapovirus)、肠道腺病毒（enteric adenovirus）、星状病毒（astrovirus）等[4]。致泄病毒具有感染力强、传播快、潜伏期短、发病急等特点，其引起的病毒性胃肠炎可导致患儿脱水、水电解质平衡紊乱、甚至死亡等严重后果。虽这些病毒很少引起慢性肠道疾病，但在HIV感染或其它免疫抑制患者，可引起持续的腹泻及慢性腹痛。 因此，及时准确地鉴别诊断，快速识别病原体，对预防病毒性腹泻的传播和患者的诊治至关重要。 病毒性腹泻实验室诊断的传统方法有基于细胞培养的病毒分离，电镜检测，免疫胶体金及ELISA快速抗原检测等。 病毒培养及电镜检测方法技术要求高，限制了其在临床的应用。抗原的ELISA及免疫胶体金检测简单，快速，应用广泛。荧光定量PCR、基因芯片等分子生物学方法敏感性及特异性明显优于其它传统方法，为病毒性腹泻实验室诊断发展方向。 一、儿童病毒性腹泻的病原学 1. 轮状病毒：在儿童感染性腹泻中，轮状病毒的感染一直是首位原因，世界卫生组织调查显示，在2008年，5岁以下儿童轮状病毒腹泻引起的死亡人数达453000[5]。轮状病毒属呼肠孤病毒科轮状病毒属，为形似车轮无包膜的双股RNA病毒，病毒为60~80nm的球形颗粒，具有20面体对称排列的内外、双层衣壳结构。基因由11个双链节段组成，编码6个结构蛋白（VP1-VP4，VP6-VP7) 和5个非结构蛋白(NSP1-NSP5)。根据内壳蛋白的抗原性不同，将轮状病毒分为7组，即A-G组，其中与人类疾病相关的只有A、B、C三组，婴幼儿腹