HPLC法测定犬口服养阴通脑颗粒后血浆中的葛根素.PDFVIP

维普资讯 中 国 药 科 大 学 学 报 JournalofChinaPharmaceuticalUniversity 2001，32(2)：l27～ 129 l27 HPLC法测定犬口服养阴通脑颗粒后血浆中的葛根素 黄 熙 ，任 平，张 莉，万海同，王骊丽，黄敬群 (第 四军医大学西京医院，西安 710032，-浙江大学，杭州 310053) 摘 要 目的 建立HPLC测定犬口艉复方葛根制荆后葛根素的血药浓度。方法 瞄沸水浴法处理血浆，以 对羟基苯 甲酸为内标 ，甲醇一水一醋酸 (5．685mol儿)i39：58：3，v／v)为流动相 ，lnertsilODS-3色谱柱 (J50mm× 4．6mm，5 )为固定相 ，流速为 00ml／min。以二极管阵列检剖器在 218Ⅲ 波长下测定并通过三维因观察其紫 外吸牧定性。结果 葛根素在 0098~0．784gg／ml范固内线性关系良好， 1O ，平均回收率为 10244 ，最 低检测限为 0．33ng，血浆中最低检剖浓度为0．0392pg／ml。结论 此法简诬 快速、灵敏、可靠，可较奸地用于口 服复方葛根素制剂血药浓度 的测定。 关键调 葛根素；高效浪相色谱法 ；血药；盎度 i音量测定 中图分类号：R969．1 文献标识码：A 文章编号：1000—5048(2001)02—0127—13 中药葛根 (CadetP— 一)是中医常用的祛风解 为市售分析纯，水为 自制双蒸水。养阴通脑颗粒 (浙 表药，其为豆科植物野葛 S／terara／o／bata(wild)Ohwi 江中医学院，含生地、葛根、川芎等)。 或粉葛P#mmson／／ 的根，葛根素(Puerarin，Pur) 1．3 动物 是其主要有效成分，临床上用于高血压、心绞痛、急 家犬，犬龄约 1年，体重 15kg左右 ，由第四军 性心肌梗塞和视网膜脉阻塞等疾病 ]葛根素血药 医大学实验动物中心提供 。 浓度测定方法已有报道 ，但均为葛根素单一物 2 方法与结果 质的静脉给药或口服给药，葛根复方制剂的犬胃内 给药的血药浓度测定未见报道。本文建立了犬胃内 2．1 标准溶液配制 给子养阴通脑颗粒(由葛根等六昧中药组成)的血 分别精密称取葛根索对照品0．98mg用甲醇 浆中Put测定的反相高效液相色谱方法 ，采用沸水 溶解，定容于 lOrcJ,的容量瓶中，得到 98．0~g／ml 浴法处理血样本 ，内标法定量，效果令人满意。 标准溶液，同法配制对一羟基苯 甲酸标准溶液作为 内标溶液 (Is)，浓度为 20096~g／ml 1 实验材料 2．2 夫血浆样品的制备 1．1 仪器与色谱条件 以0—25 巴比妥钠麻醉家犬．做气管、胃管及 Waters液相色谱系统：7725手动进样器，600 股静脉插管，将养阴通脑颗粒 以生理盐水调和，按 泵，996二级管阵列检测器，M 数据处理系统。流 剂量根据家犬体重从 胃管灌 胃，从股静脉取血，以 动相 ：甲醇一水一醋酸 (5．625otol／L)(39：58：3，v／ 肝索抗凝，离心后吸取上清液获得血浆，同法以生 v)：固定相 ：lnertsilODS一3柱．150mid×4．6mm，5 理盐水灌胃得空白血浆 。 m}ca保护柱，5Cm，1Om(大连依和特色谱有限 2．3 血样预处理及色谱分离 公司)；流速：0．9ml／min，检测波长：248nm。 用微量加样器吸取血浆 05ml，置于 5ml离 1．2 药品与试 剂 心试管中．以微量进样器准确加入内标液 2O