第四章 微生物的分类.pptVIP

第五章 細菌的培養與生長 一、培養基 人工所製備供給微生物生長、繁殖或累積代謝產物所用的營養基質稱為培養基(medium，或culture medium)。除此之外，用於微生物之分離和鑑定、抗生素敏感性之測定、水和食品的分析、工業微生物學及有關活動，專一性培養基也是很重要。雖然微生物種類、營養類型即培養目的多樣性，因而培養基的種類和配方很多，但是培養基的製備仍然有所依循。 自養型的微生物，因具有較強之生物合成能力，所以其培養基不能含有機物，應該完全由無機鹽類組成。反之，異養型微生物之生物合成能力較弱，所以其培養基中，至少要有一種有機物當作碳素源和能源，這種有機物通常是葡萄糖。 二、培養條件 微生物之生長： (1)受營養因素的影響 (2)受到培養基中之酸鹼度、氧氣、滲透壓等理化因素的影響，為了使微生物能良好的生長、繁殖，必須注意到儘可能適宜的生長環境。 1.酸鹼度(pH) 各種微生物都有各自生長的pH範圍，因而培養基pH的調整就有其必要性，真菌生長最適的pH範圍在4.0-5.8左右；酵母菌在3.8-6.0左右，細菌在7.0-8.0左右，而放線菌在7.5-8.5之間。 2.滲透壓 多數微生物都適宜在等滲透溶液中生長，且也可忍受較大滲透壓的變化。但若培養基中營養物質之濃度過高，會使滲透壓太高，而抑制微生物之生長，有時為了特殊的需要可以在培養基中加入適量的氯化鈉，以調整滲透壓。 三、培養基的類型 培養基的種類很多，可從不同的角度把培養基分成幾類： (一)依據培養基的成分 可分為合成培養基(synthetic medium)，天然培養基(natural medium or complex medium)、以及半合成培養基(semisynthetic medium)。 1. 合成培養基 有些微生物，尤其是光能自養型微生物 例如：藍細菌等，可以在含有為碳素源(一般在培養基內加碳酸鈉或重碳酸鹽類)，硝酸或氨為氮素源、硫、磷和不同礦物元素的簡單培養基上生長，像這類培養基中營養物質的濃度和化學成分已完全確定，組成成分精確，稱為合成培養基(synthetic medium)或化學成分已確定的培養基(defined medium)。 2. 天然培養基 天然培養基(natural medium或complex medium)是採用動植物組織或微生物細胞或他們的萃取物或粗消化產物配製而成的。例如一般常用的細菌培養基-營養肉湯(nutrient broth)(牛肉膏蛋白胨培養基)，beef extract-peptone medium)，因培養基的營養物質都是天然的，成分不穩定，所以又稱為化學成分不確定的培養基(undefined medium)。製備這類培養基常用蛋白腖(peptone)、牛肉膏、酵母膏、玉米粉、牛奶、血清及馬鈴薯為原料配製而成。 3. 半合成培養基 半合成培養基(semisynthetic medium)是在天然有機物質的基礎上，適當第加入已知成份的無機鹽類，或在合成培養基的基礎上，添加某些天然成分(如馬鈴薯)如此可使培養基更適合於維生對營養物質的需求。 有時為了微生物表面培養，必需採用固體培養基(solid medium)，他是在培養基中加入1.5%的瓊脂所配製而成的。瓊脂又名洋菜，是從紅藻(如石花蔡)中提煉出來的。 (二)依據培養基的用途 可分為選擇培養基(selective medium)和鑑別培養基(differential medium)，因為支持許多微生物的生長稱為通用培養基(general purpose media)，而將血液和其特別營養分加入通用培養基內以促進營養苛求異養菌之生長的特殊強培養基稱為優厚培養基或富集培養基(enriched medium)。 1. 選擇培養基 選擇培養基有經由加入抑制非目的的微生物，但不妨礙目的微生物的物質，已達到選擇的目的，常用之抑制劑(物質)有抗生素和染料，例如分離真菌用之培養基常加入抑制細菌生長的鏈黴素獲金黴素。有時為培養的某種微生物，就在培養基中加入目的微生物特別需要的營養物質，使培養基營養更優厚，以達到選擇的目的，這種選擇培養基即已提過的優厚或富集培養基。 2. 鑑別培養基 要想在自然材料中找出特殊型態的微生物，最好把微生物培養於鑑別培養基(differential medium)內，在培養基中加入某種化學物質(指示劑或抑制劑)或某種營養物質，而使目的或對象微生物的菌落，具有一獨特的外觀而