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电镜实用 第10次课

* 电子束与样品的相互作用 扫描电镜的成像原理 第二节 扫描电镜的成像原理 一、电子束与样品的相互作用 2.与扫描电镜成像有关的信号 二次电子 X-射线 背散射电子 1.信号的种类(与透射电镜相同) (1)二次电子   它在扫描电镜成像过程中担任主角。它是样品本身的原子中的外层电子,被入射电子激发出来后,形成带有样品的形貌和成分等信息的电子束。二次电子主要反映样品浅表层(约5~50nm)的信息。 (2)X-射线   又称伦琴射线,波长约0.0001~l0nm。电子探针轰击样品时,可产生特征X-射线和连续X-射线。其中特征X射线的波长和能量随样品中各种元素的不同而各异。我们根据这一性质可以对样品中的某些元素进行定性和定量的分析。X射线主要反映样品深层(约50~500nm)的某些信息。 (3)背散射电子   又称背反射电子,是被样品大角度反射回来的入射电子。它主要反映样品内部较深层 (约50~100nm)原子的质量信息。另外晶体样品的特征也是利用背散射电子的衍射图反映出来的。 二、扫描电镜的成像原理 二次电子成像在扫描电镜成像过程中起主导作用。当电子探针与样品相互作用时,由于样品浅表层的形貌、成分和结构等的不一致,在多种效应的综合作用下: 对图像的反差起主导作用的样品表面的凹凸效应 可增加图像的立体感的倾斜角效应 导致图像边缘过亮,反差不自然的边缘效应 与反射电子的数量有关的原子序数效应 以及加速电压效应等 1.二次电子的成像 从样品的不同区域所激发出的二次电子的数量是不同的,那么先后转换的电信号和电压信号也相应的差异,最终导致在荧光屏上的图像中与其相对应的位置上的明暗也有差异。这种在荧光屏上可反映样品信息的图像被称为二次电子图像。   首先,扫描电镜的电子枪发射的电子束经1~40kV的高压形成加压电子束,在聚光镜的汇聚作用下,又形成直径约3~10nm的电子探针。   接着,电子探针在扫描线圈崎控制下对样品的表面进行光栅状扫描(犹如一行行地读横版的书),并激发出多种带有样品信息的电信号,其中二次电子、特征X射线和背散射电子与扫描电镜的成像关系密切。 2.扫描电镜成像的原理 如:样品中凸出的部位会产生较多的二次电子,而二次电子的数量越多,转换成的电压信号也越强,图像中相应的部位就越亮。特征X射线可以反映样品中元素的种类和数量的信息。而背散射电子的散射方向是不规则的,主要受原子质量和密度的影响,也可以反映样品表面元素组成上的差异,尤其适宜观察样品表面凹洼的区域,这一特点正好与二次电子的成像互补。   上述这些电信号经不同的检测器收集后,被转换成带有样品信息的电压信号,这种电压信号被送入显像管的栅极,并能控制显像管的图像的亮度等。需要强调的是,电子探针在样品表面的扫描,与供观察、拍照的两个显像管中的电子束在荧光屏上的扫描是同步进行的,这样就便电子探针在样品表面扫描时所产生的信息,也以动态的形式一点点地同步反映到两个荧光屏上了,使我们得以观察和记录。 扫描电镜的性能 扫描电镜的应用 扫描电镜的一般操作程序 第三节 扫描电镜的性能与应用 一、扫描电镜的性能 1.扫描电镜的性能 扫描电镜的照明源也是电子束,但要经多级 聚光镜(电磁透镜)把它聚集成直径只有几纳 米的电子探针。 扫描电镜的分辨力可达0.5~l0nm,放大倍 数20万左右。 成像反差主要决定于二次电子的数量。 在放大500倍时的焦点深度约为1000μm。 样品的图像靠显像管在荧光屏上显示。可用 计算机对不同的灰度做相应的颜色处理,给 图像加上彩色。 适用于扫描电镜的样品种类繁多,以各种实 体为主,不用制作超薄切片,对样品的厚度 也不苛求,只要能放入样品室即可。 样品需在真空环境下检测。 2.扫描电镜的特点 扫描电镜的图像比透射电镜的立体感强,这 是由于它的景深要大得多的缘故。 与透射电镜相比,扫描电镜的电子探针直径 小,能量也小,加上对样品作光栅状扫描时, 并不固定照射样品的某一区域,这样就大大 减少了对样品的损伤和污染。 制备扫描电镜的样品相对容易,因为二次电 子的成像与样品的厚度无关,所以不需制备 超薄切片。 又因为样品室足够大,所以可观察较 大的样品(一般在12*8*5cm的范围以内)。 样品还能在三维空间做一定范围的移动, 用以扩大观察面。 我们用扫描电镜观察样品的同时亦能同 步做微区元素分析,再加上免疫标记和 冷冻制样技术的发展,不断开拓了扫描 电镜的研究领域,使其优势越发显示出来。 二、扫描电镜的应用    扫描电镜的应用范围很广,已在生物学、医学、遗传学和细胞生物学,以及材料科学、工农业、林牧业等方面的科学

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