实验一屈.pptVIP

医学微生物学实验;实验一;一、实验室生物安全; 例二：1998年，我国某大城市的某高校在使用大白鼠进行试验时，有两名学生被大白鼠咬伤，还有一些学生在给实验老鼠放血、解剖的过程中，未按照要求操作，结果在29名实验人员中，有9人感染了流行性出血热。 ; 例三：2003年12月6日，台湾某病毒实验室的一位研究员在操作过程中，因清理废弃物感染了SARS。 2003年12月17日，台湾“卫生署疾病管制局”证实，一名非典研究人员在全球安全等级最高的生物安全四级实验室，因违规操作感染了非典病毒。; 例四：2004年4月，中国疾病预防控制中心科研人员，采用未经论证的非典病毒灭活方法，在不符合防护要求的普通实验室内操作非典感染材料，造成北京、安徽发生非典疫情。;一、实验室生物安全;医学微生物学实验室规则;实验室意外紧急处理办法;;;二、分类;双糖铁培养基;培养基的制备程序;肉汤培养基制作方法;4.测定酸碱度并调至pH7.6，必要时用滤纸过滤。 5.按需要分装于试管或烧瓶内，加棉塞，置高压蒸汽灭菌器内，经121.3℃、20-30分钟灭菌。 6.灭菌后置37℃温箱孵育24小时，无杂菌生长，即可应用或放冰箱备用。 ;液体培养基加入1-2%的琼脂为固体培养基，加入0.5%琼脂为半固体培养基。固体培养基加入血液即为血平板（营养培养基）。 ;三、细菌的接种技术;分区划线;;; 3.半固体穿刺接种法：保存菌种或观察细菌的动力和生化反应 4.液体接种法：用于肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等液体培养基 的接种 ;四、生长现象的观察;半固体培养基-鞭毛 观察细菌的运动;液体培养基-生长;属操作内容;;革兰染色(Gram stain) 1884年由丹麦医师Gram创立 革兰染色是最常用的一种染色方法，可以将细菌初步分为革兰染色阳性菌和革兰染色阴性菌，在临床上具有非常重要的意义;一、目的; 1、通透性学说 2、等电点学说 3、化学学说; 通透性学说; 等电点学说;化学学说;;冲洗;一 一 半 半;图一;无菌操作（接种环灭菌和取菌） 涂片的厚度要适中 染色的时间控制，一一半半 冲洗的方法，不要对着涂片区冲洗; 七、意义;细???的特殊结构（示教）（二毛荚一胞）;菌发出比鞭毛更更细、短、直、硬和多的丝状蛋白附属物，与运动无关，菌毛中空，可分为普通菌毛和性菌毛 功能：普通菌毛附黏膜，性菌毛传递遗传物质 ;;菌体内部物质缩水（60％）形成圆或卵圆形小体。 功能：芽胞形态辨细菌， 灭菌标准抗力强。; 注：油镜的使用方法 寻找视野：在使用油镜之前，必须先经低、高倍镜观察，然后将需进一步放大的部分移到视野的中心。 增大光照强度：将聚光器上升到最高位置，光圈开到最大。 转高倍镜头、滴加镜油、换油镜头：转动转换器，使高倍镜头离开通光孔，在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢转动油镜，在转换油镜时，从侧面水平注视镜头与玻片的距离，使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。;;; 透镜 折光率 油 1.515 1.0 空气 玻 1.52 璃 空 气 油镜原理示意图; 实验报告;作业重点;