冷冻固定.PDF

CLEM 介绍 Leica Nanotechnology Leica Microsystems Light Microscopy - Electron Microscopy SEM Image FLM Image TEM Image Fibroblast cell from mouse embryo tissue HeLa cells, triple Adenovirus with 从小鼠胚胎组织中的纤维原细胞 labeled attached gold nanoparticles 腺病毒 Light Microscopy - Electron Microscopy 介绍 应用领域  光镜电镜联用技术（CLEM ）实现对同一样品将荧光显微学分析和电子显微镜分析 的相关联。  这一方法实现光镜下对大区域的高效成像和电镜下对感兴趣区域的快速检测。 光学显微镜 电子显微镜 Fluorescence Light Microscopy Transmission Electron microscopy (FLM) (TEM) Trend to move from RT CLEM to cryo CLEM due to significant improvement in results 介绍 光镜电镜联用技术 Correlative Light Electron Microscopy 介绍 第一种： 化学样品制备/工作流程（室温流程） 优势：  简易流程（简单易用）  标准流程被广泛应用 化学固定 冷冻固定 劣势：  化学固定会导致明显假象！ - 化学固定本身产生的假象 - 化学固定时间长导致的假象 草履虫（属纤毛虫门） 介绍 第二种： 半冷冻样品制备/工作流程 Semi Cryo Sample Preparation / Workflow 优势：  形成的假象较少 = 冷冻固定步骤可降低化学固定产生的假象  也是简单易于操作的流程 介绍 徕卡半冷冻CLEM工作流程图 Leica Semi Cryo CLEM Workflow 或者 定位网格 光学显微镜 Finder Grid 高压冷冻 利用定位网格实现手段 冷冻替代 位置标定和找寻 （无内置软件） 修块 应用: 生物样品 光学与电镜图像比对分析 超薄切片