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实现精准的细胞计数四个关键要素
白皮书 Countess II FL 自动细胞计数仪
实现精准的细胞计数的四个关键要素
简介 I. 样本制备
许多生物科学应用需要精准地测量细胞数量和存活率, 如何制备目的细胞对手动和自动细胞计数的影响极
然后再进行下游分析 您可以采用传统的血球计数仪和 大 应保持样本均匀性 方能确定计数差异是由实验
。 。 ,
显微镜进行手动评估或者采用自动细胞计数仪自动计 处理还是样本制备条件引起的。
数 如 ™ ™
, Invitrogen Countess II FL 。
下面是样本制备的一些小技巧 可以提高您的计数准
,
当使用玻璃制血球计数器及显微镜进行手动细胞计数 确度和精度。
时 经验丰富的细胞生物学家对单一样本进行多次计
,
标准化细胞操作步骤。在很多情况下 应比较来源于
• ,
数的差异通常为 或更高 当多位科学家对单一样本
10% 。
不同的培养瓶或培养板中的多个样本的细胞存活率和
进行计数时 差异值通常超过 使用自动细胞计数
, 20%。
浓度 必须认识到细胞操作步骤的微小差异 包括水
。 (
仪可以最大程度地消除手动计数的主观性 以及总细
,
解 移液或离心步骤 会对不同样本的总细胞计数和
、 )
胞计数和存活率检测中的用户间差异 帮助您节省时
,
存活率产生极大的影响。
间。Countess II 自动细胞计数仪的用户遵循本文列出的
小技巧 计数间差异一般应可以达到 的 值 • 确保细胞悬液混合均匀。利用短暂且温和的涡旋振荡
, 5% CV 。
方法或手动搅拌试管 有时被称为 手指轻弹 技
—— “ ”
不论选择何种细胞计数平台 对单一样本进行重复计数
, 巧 可以制备均匀的悬液 将细胞置于实验台上静
—— 。
或计数多个样本时获得精准的计数值至关重要 但有时
, 置一会然后移液 会导致细胞沉至管底 形成人为的
, ,
也面临诸多挑战 本文列出了实现精准的细胞计数的四
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