天然产物的提取分离方法-中药与海洋药物试验室.PPT

液体CO2由高压泵加压到萃取工艺要求的压力并传送到换热器，将CO2流体加温到萃取工艺所需温度后进入萃取器，在此完成萃取过程。负载溶质的CO2流体在分离器中改变温度压力，溶解度降低使萃取物得以分离。分离萃取物后的CO2流体再经换热器液化后回到储罐中循环使用。 pH梯度萃取法 第三节 结构研究法 结构研究的特点：难于合成品 结构研究的总原则: 尽可能不消耗或少消耗试样 波谱综合分析 与文献数据比较 必要时辅以化学手段 第三节 结构研究法 一、纯度的测定 二、结构研究的主要程序 三、结构研究中采用的主要方法 一、纯度的测定 纯度检查法： 均一的晶形 敏锐的熔点、沸点、折光率、比旋度 TLC、PC、GC、HPLC 三、结构研究中采用的主要方法 1. 确定分子式，计算不饱和度 2. 质谱 （MS，mass spectrum） 3. 红外光谱（IR，infrared spectra） 4. 紫外-可见吸收光谱（UV-vis) (ultraviolet-visible spectra） 5. 核磁共振（NMR，nuclear magnetic resonance） 6. 其他：X-单晶衍射法 旋光光谱（ORD） 圆二色谱（CD） 1. 确定分子式，计算不饱和度 分子式的确定 元素定量分析结合分子量测定 同位素丰度比法 高分辨质谱（HR-MS，high resolution mass spectrum ） 不饱和度的计算 u=Ⅳ－Ⅰ/2＋Ⅲ/2＋1 Ⅰ：一价原子数 如H、X Ⅲ：三价原子数，如N、P Ⅳ：四价原子数，如C 2. 质谱（MS，mass spectrum） 作用： 确定分子量、分子式 提供部分结构信息 ——丢失碎片的大小 如15、17 ——碎片的m/z及裂解方式 2. 质谱（MS，mass spectrum） 常用质谱技术及特点 电子轰击质谱（EI-MS，electron impact ionization） 场解析质谱（FD-MS，field desorption ionization） 快速原子轰击质谱（FAB-MS，fast atom bombardment） 电喷雾质谱（ESI-MS，electrospray ionization） 基质辅助激光解析质谱（MALDI-MS） matrix-assisted laser desorption ionization 电子轰击质谱（EI-MS,electron impact ionization） 样品需加热气化，离化，得到M+ 难气化、易热解的成份测不到M+ 如糖、苷、氨基酸、肽、蛋白、核酸、抗生素 场解析质谱（FD-MS,field desorption ionization) 试样稀液涂于钨丝上作阳极，对面加阴极，通高压，电离 难气化、易热解的成份，可得到 分子离子相关峰：[M＋H]+、[M＋Na]+、[M＋K]+ 逐个脱去糖基的碎片峰：[M＋H-162]+、[M＋H-162-146]+ 苷元的碎片离子相对少 快速原子轰击质谱（FAB-MS,fast atom bombardment) 离子枪发射高能离子与另一中性粒子碰撞，交换电荷， 形成高速中性粒子，与样品碰撞，使其电离 难气化、易热解的成份，可得到 分子离子相关峰：[M＋H]+、[M＋Na]+、[M＋K]+ 逐个脱去糖基的碎片峰：[M＋H-162]+、[M＋H-162-146]+ 可得到苷元的碎片 电喷雾质谱（ESI-MS,electrospray ionization ) 强静电场使试样电离， 难气化、易热解、大分子、小分子，均可得到 分子离子相关峰：[M＋H]+、[M＋Na]+、[M＋K]+ 基质辅助激光解析质谱（MALDI-MS,matrix-assisted laser desorption ionization) 用于研究结构复杂，不易气化的大分子物质的分子量 如多糖、蛋白、核酸等 3. 红外光谱（IR，infrared spectra） 原理： 化学键的振动在红外光区（4000～625cm-1）引起的吸收谱图 作用： 特征频率区（functional group region） 4000～1500 cm-1————确定官能团类型 指纹区（fingerprint region） 1500～60