第2章 实验室设备和1般技术.ppt

组织培养实验室的面积大小和装备程度取决于两个因素： 一是所要进行的实验的性质 二是所能得到的经费的多少 标准的组织培养实验室应当具备设施 1.玻璃器皿、塑料器皿和其他实验器皿的清洗和贮存. 2.培养基的制备、灭菌和贮存. 3.植物材料的无菌操作. 4.将培养物保持在温度、光照、可能时还有湿度的可控条件下. 5.培养物的观察。 第一节 实验室设计和常用设备 第二节 器皿用具 第三节 培养条件 （一）准备室 准备室（又称化学实验室），要求20m2左右，明 亮，通风。 任务——器皿洗涤，培养基配制、分装、 高压灭菌，材料预处理，重蒸馏水的制备等。同时兼顾试管苗出瓶。 需安装一个较大的水池，水泥制作，白瓷砖砌内外表面，池底放一张橡胶垫，以减少玻璃 器皿的破损。下水道应畅通，以免妨碍工作。 大型工 作台1-2张，大桌子1-2张。 玻璃橱1-3个，用以放置药品、培养瓶和物品等。此外还应有化学药剂，仪器设备，各种器皿，烘箱、冰箱、天平、酸度计、蒸馏水发生器或纯水发生器、高压灭菌器、电炉、不锈钢 锅、培养基分注器、盆与桶等。 （二）缓冲室 为避免进出时带进杂菌，无菌室外应设置缓冲室，面积约3m2-5m2。进入无菌室前需在缓冲室里换上经过灭菌的卫生服、拖鞋，戴上口罩。最好安装1盏紫外灯，用以灭菌。墙上设衣帽钩，门边摆拖鞋或设1鞋箱。还应安装1个配电板，其上设保险丝盒、闸刀开关、插座以及石英电力时控器等。石英电力时控器是自动开关灯的设备，将它和交流接触器安装在电路里就可以自动控制每天的光照时数。 （三）无菌操作室 简称无菌室或接种室，10m2-20m2，具体视生产规模和超净工作台数量而定。是组培室最关键的部分。门窗要密闭，一般用移动门窗，以减少空气的扰动。安装紫外灯空调操作台和搁架以放置组培的操作器具和灭菌后待接种的培养瓶等。其主要仪器设备有：超净工作台、空调机、医用小平车等。 （四）培养室 培养室是将接种到培养瓶等器皿中的植物材料进行培养的场所。其面积根据培养规模和经济条件来确定。为了满足外植体的生长和发育，培养室要具备适宜的温度、湿度、光照、通风等条件。其主要设计如下： 培养架子和灯光 通风设施 边台 （五）驯化室 当试管苗长出一定量的不定根，根长在0.5cm-1cm时，及时移栽驯化。驯化室通常是在温室的基础 上营建。驯化室要求清洁无菌，配有空调机、除湿 器、恒温恒湿控制仪、喷雾器、光照调节装置、通 风口以及必要的杀菌剂。面积大小视生产规模定。 （六）温室 为了保证试管苗不分季节地周年地生产，必须有足够面积的温室与之配套。温室内应配有温度控制装置、通风口、喷雾装置、光照调节装置、杀菌杀虫工具及相应药剂。 二、常用设备 1．超净工作台 2．无菌箱 3．空调机 4．除湿机 5．恒温箱 6．烘箱 7．高压灭菌器 8．冰箱 9．天平 10．显微镜 11．水浴锅(微波炉）12．摇床 13．转床 14．蒸馏水发生器 15．酸度计 16．离心机 4．除湿机：湿度也要求恒定，一般保持70%- 80%，湿度过高易滋长杂菌，湿度过低培养器皿 内的培养基会失水变干，从而影响外植体的正 常生长。湿度过高时，可采用小型室内除湿机 除湿，当湿度过低时，可采用喷水来增湿。 5．恒温箱:又称培养箱，可用于植物原生质 体和酶制剂的保温，也用于组织培养材料的保 存和暗培养。恒温箱内装上日光灯，可进行温 度和光照实验。 6．烘箱：可以用80?C-100?C的温度，迅速干 燥洗净后的玻璃器皿。也可以用160?C-180?C的 温度，进行1h-3h的高温干燥灭菌。还可用80?C 的温度烘干组织培养植物材料，以测定干物质。  7．高压灭菌器： 是一种密闭良好又可承受高 压的金属锅，其上有显示灭菌器内压力和温度 的表头。灭菌器上还有排气孔和安全阀。 8．冰箱 有普通冰箱、低温冰箱等。用于在常温下易变性或失效的试剂和母液的储藏，细胞组织和试验材料的冷冻保藏，以及某些材料的预处理。  9．天平 包括药物天平、扭力天平、分析天平和电子天平等。大量元素、糖、琼脂等的称量可采用感量为0.1g的药物天平，微量元素、维生素、激素等的称量则应采用感量为0.0001g的分析天平。有条件的，最好配用感量为0.0001g的电子天平。 10．显微镜: 包括双目实体显微镜（解剖镜）、 生物显微镜、倒置显微镜和电子显微镜。显微镜 上要求能安装或带有照相装置，以对所需材料进 行摄影记录。有：双目实体显微镜