蓝隐藻藻蓝蛋白构与功能稳定性研究.PDF

蓝隐藻藻蓝蛋白结构与功能稳定性研究 李文军, 陈 敏 ( , 264005) 摘要: 以蓝隐藻(Chroomonas placiodea)藻蓝蛋白 PC-645 为材料, 通过改变环境 pH 和尿素质量浓度, 监测其变性和复性过程中特征荧光谱和吸收谱的动力学变化, 以期了解隐藻藻蓝蛋白的色基和蛋白结 构稳定性及其与功能的关系。结果表明, PC-645 在很宽的 pH 范围和一定质量浓度的尿素中维持结构 和功能的稳定, 空间结构具有很强的柔性。pH 诱导的 PC-645 蛋白构象与功能变化可分为 3 个不同的 区段。(1)稳定区(pH 3.5~7): 吸收和荧光光谱都比较稳定, 显示蛋白质构象和功能在此区域都保持正 常。(2)次稳定区(pH 7~10): 光吸收依然保持平稳, 亚基内部的色基的状态和疏水微环境都没有改变, 但荧光传递效率降低, 可能是由亚基表面局部构象变化、解离(四级结构变化)或者色素基团间的空间距 离变化引起。(3)不稳定区(pH3.5 和 pH 10), 吸光度和荧光强度都呈快速下降, 色基在近紫外和可见 光区的吸收峰位变动, 蛋白构象处于快速崩溃期。PC-645 在酸性条件下的稳定性高于在碱性环境下, 是与隐藻藻蓝蛋白所处的特殊环境及生理功能相适应的。 关键词: 蓝隐藻(Chroomonas placiodea); 藻蓝蛋白; 吸收光谱; 荧光光谱; 构象稳定性 中图分类号: Q946.1 文献标识码: A 文章编号: 1000-3096(2013)07-0033-08 [4] PC-645 , 500~650 nm , (αβ)(αβ), 1 2 , , , [5] , , , , , [6-7], , , , , , , [1] (C.placiodea)PC-645 , pH [2], (PC)(PE), , , PC-645 , , , , , 1 材料与方法 , , [3] (Chroomonas 1.1 PC-645 样品制备 pla