miR-148a对肝癌细胞株侵袭和迁移的抑制作用及机制-中国癌症杂志.PDF

中国癌症杂志 2014年第24卷第6期 《 》 412 CHINA ONCOLOGY 2014 Vol.24 No.6 miR-148a对肝癌细胞株 侵袭和迁移的抑制作用及机制 贾筱琴　缪俊俊　雍军　张子兰　花晨　李国利 扬州大学医学院病理学教研室，江苏 扬州 225009 　　［摘要］　背景与目的：原发性肝癌是肝细胞或肝内胆管上皮发生的恶性肿瘤,其复发和转移十分常见。 本实验以慢病毒介导miR-148a,感染人肝癌SMMC-7721细胞,观察其对SMMC-7721细胞侵袭和迁移能力的影响。方 法：选用SMMC-7721肝癌细胞株，进行miR-148a慢病毒载体的构建，筛选稳定表达miR-148a肝癌细胞株。RT- PCR检测细胞中miR-148a的表达水平。划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞侵袭迁移能力。采用明胶酶谱 法测定MMP-2、MMP-9的活性。蛋白质印迹法(Western blot)检测MMP-2、MMP-9和EMT相关蛋白(E-cadherin、 vimentin)的表达情况。结果：RT-PCR结果显示，和对照组相比，LV-miR-148a肝癌细胞感染组表达miR-148a明 显增高，体外侵袭实验细胞划痕实验显示过表达miR-148a后SMMC-7721的侵袭和迁移能力明显下降。明胶酶谱 法结果显示过表达miR-148a的肝癌细胞，MMP-2和MMP-9降解明胶的能力下降(P0.05) 。过表达miR-148a同时能 降低肝癌细胞SMMC-7721中vimentin、MMP-2和MMP-9蛋白的表达，但并未影响E-cadherin的表达。结论：miR- 148a在体外能抑制肝癌细胞SMMC-7721的侵袭和迁移，其机制可能与下调MMP-2、MMP-9和vimentin的表达水平 有关。 　　［关键词］　miR-148a；肝细胞癌；侵袭；迁移；MMP-2；MMP-9 　　DOI: 10.3969/j.issn.1007-3969.2014.06.003 　　中图分类号：R735.7　　文献标志码：A　　文章编号：1007-3639(2014)06-0412-06 Inhibition of the invasion and migration of hepatocellular carcinoma cells by miR-148a and the mechanisms JIA Xiao-qin, MIAO Jun-jun, YONG Jun, ZHANG Zi-lan, HUA Chen, LI Guo-li (Department of Pathology, Medical College of Yangzhou University, Yangzhou Jiangsu 225009, China) Correspondence to: LI Guo-li E-mail: miaoyzu@ 　　［Abstract ］ Background and purpose: Primary liver cancer is the malignant tumor of liver cells or intrahepatic bile duct epithelium with familiar metastasis and postsurgical recurrence. The purpose of this study was to investigate the effects of miR-148a on the invasion and migration of hepatocellular carc