WatersBreeze高效液相色谱系统操作规程.PDF

Waters Breeze 高效液相色谱系统 操作规程 1. 开机 依次打开泵以及检测器、柱温箱的电源，等到检测器自检完毕后，打开计算 机，登录Windows，并进入Breeze 软件。 2. 灌注泵 2.1. 配制准备流动相，过滤并超声后置于清洁的溶剂瓶内，将溶剂过滤头放到 溶剂瓶中。 2.2. 单击采集栏上的“Purge wizard ” 2.3. 选择 “purge pump 冲洗该泵，然后单击“Next ”。若未灌泵，应使 用灌注注射器，打开排液阀并抽取 10ml 的洗脱剂，（一般为超声过滤的注 射用水）关闭排液阀，再单击“Next ” 2.4. 打开参 阀（右边） 2.5. 如果冲洗时的流速低于默认的流速5ml/min，在标尺下方的文本框中输入新 的流速，单击Next ，此时开始冲泵。“Purge time”计数器监视冲洗时间， （默认时间为5 分钟）在完成之前，单击“Stop purge ”按钮停止清除操作。 2.6. 冲洗完毕，关闭对话框。 3. 平衡 3.1. 单击采集栏上的 “Equilibrate”。 3.2. 在下拉列表中选择所需方法，单击“Equilibrate”。 3.3. 系统留出约 20min 时间进行平衡，或直到基线稳定。（单击 “abort Run ”退出基线监视器） 3.4. 手动进样 3.5. 单击采集栏上的 “make single injection”。 3.6. 对话框 （Specify Single Inject Parameters）将出现， 在此框中输入样品名称（Sample Name），方法（method ）、进样体积（Inj ection Volume）、运行时间 （run time ）。 3.7. 单击“Inject”，弹出进样对话框。 3.8. 把进样器手柄扳到载样位置（load ） 3.9. 用供试溶液清洗配套的注射器，再抽取适量供试品溶液，如用定量环（loop ） 满载样，则注射器抽取量应不少于定量环容积的5 倍，用微量注射器定量 进样时，进样量不得多于环容积的 50%，在排除气泡后方能向进样器中注 入供试溶液。 3.10. 把注射器的平头针直插至进样器的底部，注入供试溶液，除另有规定外， 注射器不应立即取下。 3.11. 将手柄扳转至进注样位置（Inject ），定量环内供试溶液即被流动相带入流 路。 4. 结束采样及数据处理。 4.1. 采样完毕后，单击 “Abort Run ”退出基线监视器。 4.2. 单击命令栏上的Find Data，选择“Results”选项卡。 4.3. 单击“Review Data，选择相应的色谱。 4.4. 单击 （处理方法向导，Processing Method Wizard），出现下图： 选择 “Start New Processing Parameters ”，然后单击OK。 4.5. 弹出 “Integration-Integration Region-Uvchl”对话窗，输入积分开始时间 （Sstart ）及积分结束时间 （End ），选择“Next ”。 4.6. 弹出 “Integration-Peak Width and Threshold-Uvchl”，确保没有选中“clear Peak Width and Threshold”，然后单击“Next ”，采用默认的参数。 4.7. 弹出 “Integration-Peak Rejection”对话窗，使用鼠标左键，放大最小的所 关注峰值，然后单击选中该峰值 （峰值变为红色）。 4.8. 弹出 “Calibration-General-UVch1”对话窗，单击“Next ”，即可。 4.9. 单击“Calibration-Names and Retention Times-Uvchl”删除不需要的峰。 4.10. 弹出 “Calibration-Default Amounts- Uvchl”，单击“Next ”。 4.11. 弹出“Calib