动物组织石蜡切片制作-医学试验中心仪器平台.PPT

动物组织石蜡切片制作-医学试验中心仪器平台.PPT

  1. 1、本文档共16页,可阅读全部内容。
  2. 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
  3. 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  4. 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
动物组织石蜡切片制作-医学试验中心仪器平台

动物组织石蜡切片制作 科研仪器管理中心 实验目的 制作实验动物的组织切片并染色,掌握动物组织制片技术 实验用品 1.动物的组织。 2.器材和仪器:切片机、展片仪、毛笔、载玻片、盖玻片、烤箱、显微镜。 3.试剂:60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇、95%乙醇、无水乙醇、二甲苯、石蜡、中性树胶。 方案一:病理石蜡切片的制作 (一)石蜡组织块制作 1.取材。 2.固定。 3.脱水、透明及浸蜡(具体步骤见表)。 4.包埋 步 骤 ?操作项目 ?小 鼠 ?大?鼠 ?家 兔 (1) 60%乙醇 15min 20min 30min (2) 70%乙醇 15min 20min 30min (3) 80%乙醇 20min 30min 40min (4) 90%乙醇 20min 30min 40min (5) 95%乙醇Ⅰ 20min 30min 40min (6) 95%乙醇Ⅱ 20min 20min 30min (7) 无水乙醇Ⅰ 20min 30min 40min (8) 无水乙醇Ⅱ 20min 30min 40min (9) ?二甲苯Ⅰ ?5min ?8min 10min (10) ?二甲苯Ⅱ ?3min ?5min ?5min (11) ? 石蜡Ⅰ 10min 15min 20min (12) ? 石蜡Ⅱ 20min 25min 30min (13) ? 石蜡Ⅲ 30min 30min 40min 注意事项 一般实质性脏器的组织及肿瘤组织应把最大切面朝下包埋;食管、胃、肠等组织须将管壁横断面朝下包埋,若在同一蜡块中包埋数块管壁组织时,应平行横埋且黏膜面(内膜)的方向应一致,以便切片及观察。 △同一蜡块包埋多个组织块时,组织的性质应相同,方向要一致,不能把大小、厚薄差别悬殊的组织包埋在一起,组织块间的距离不能太大。 △皮肤、骨等难切组织及需要连续切片的组织都应单独包埋。 △神经、脊髓及需要定向包埋的组织应注意组织块的相互关系。 △包埋(尤其在室温较低的情况下)操作应迅速,防止组织块变凉、蜡液凝结及出现气泡,组织块与蜡液不能很好凝固定在一起,导致组织与蜡分离。 △遇有管腔或空洞标本与小标本同埋一个蜡块时,不能将小标本放入其他标本的管腔或空洞内。 (二)石蜡切片制作 用切片机将石蜡包埋的组织块(蜡块)制成适宜厚度的切片,是目前在病理学科中最常用的一种制片方法。切片厚度为一般4~6μm。 【切片前的准备】 1、修切蜡块? 切片前应先修块,即切去组织周围过多的石蜡,一般留下约2mm宽度的蜡边为宜。注意蜡块不能留得太窄,在切片时易损坏组织;蜡边不能留得太多,否则影响展片。室温过高时,可将修好的蜡块放到冰箱中冷却一定时间。 2、切片用品准备 (1)切片刀:预先磨好切片刀备用或切片前更换新的一次性切片。 (2)载物片:载物片经清洁液、95%乙醇处理后备用。 (3)展片仪:加入温水,接通电源,调整温度。 (4)其他用品:准备好毛笔、记号笔、镊子、冰块等。 【切片制作过程】 以使用旋转式切片机石蜡切片为例: 1.将切片刀装在刀架上,后将蜡块装在切片机固定装置上。调整蜡块与刀至合适位置(刀刃与蜡块切面呈5°夹角)旋转式切片机切取组织,是由下向上切,为得到完整的切片,防止组织出现刀纹裂缝,应将组织硬脆难切的部分放在上端(如皮肤组织,应将表皮部分向上。而胃肠等组织,应将浆膜面朝上)。 2.左手执手笔,右手旋转切片机旋转轮。先粗切标本,直到暴露出组织最大切面(但对小标本不要修切得太多,以免将整个组织块修切掉)。再连续旋转切出蜡带,左手持毛笔将蜡片带下端轻轻托起,右手用镊子夹起蜡带上端,正面向上放入展片仪水盒内,展片温度根据使用的石蜡熔点进行调整,一般水温为45℃左右,待蜡片带中的组织展平后,即可进行分片和捞片。对于展片困难的切片经30%的乙醇初展后,再用载玻片捞起蜡带放人展片仪水盒内可使切片更易展平。在夏季切片时可用冰块冷却切片刀和组织块,减少切片刀与组织块在切片过程中产生的热时,使石蜡保持合适的硬度以利于切片。 3.捞起切片后,写上编号。捞片时注意切片的位置,一般切片的中心位于载物片右侧1/3与2/3交界处为佳,并注意整齐美观。 4.烤箱60℃左右烘烤切片30min,对血凝块和皮肤组织应及时烤片,烤片温度应稍低;脑组织切片捞出后直立晾干,再烤片,否则产生气泡。 方案二 石蜡切片的制作 1—6微米。制作大批的或是连续的切片。长期保存。 一、切片前的准备: 1、恒温水浴锅首先预热至35℃—40℃。 2、蜡块整修,暴露组织并修平,减少刀的磨。 3.载玻片应事先洗涤干净,无油腻和不透明现象。涂粘片剂。 4、将锋利的刀片,调整角度和位置,以20°-30°为佳。 5、备用小型毛笔、小型无钩镊子、铅笔。 方案二 石

文档评论(0)

wumanduo11 + 关注
实名认证
内容提供者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档