小麦印度腥黑粉线粒体DNA提取及其ATP6基因在真菌遗传发育分析中的应用.pdf

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 !（）： # ’ ( ’$$ 年 月 日 $%% % ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! )*+,-./ $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 小麦印度腥黑粉菌线粒体!# 提取及其#$% 基因 在真菌遗传发育分析中的应用 $ $ 周业琴 ，易建平 ，周国梁 ，董 英 $ （江苏大学食品与生物工程学院 镇江 $$%0 ） （上海出入境检验检疫局 上海 $%%0# ） 摘 要：小麦印度腥黑粉菌（ ）是一种世界范围的重要检疫性有害真菌，该病原菌和近似种之间冬 !##$% ’() N?+/; 孢子的形态特征极为相似，遗传关系非常相近。为了从分子水平上探讨小麦印度腥黑粉菌和近似种之间线粒体基 因序列的差异，从新鲜菌丝中提取总 ，经两次氯化铯密度梯度超速离心分离线粒体 （ ），提取的 1OP 1OP +1OP 纯度较高，可用于克隆、酶切分析和 扩增等分析。选取基因 （ ）的序列，并结合 +1OP QRS P7Q ;T.J,D?J. +/?BE,DBE;+. 9 U.JV;JW 中相关种类的P7Q9 基因1OP 序列进行了系统发育分析。结果表明，线粒体基因P7Q9 可用于科属水平的 分类鉴定。 关键词：小麦印度腥黑粉菌；线粒体1OP；系统发育分析 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） X300 P %%%69$%3 $%% %#6%’6%9 小麦印度腥黑粉菌 !##$% ’() N?+/; 是一种 U.JV;JW 中腥黑粉菌的线粒体基因序列只有同 世界性的重要检疫性真菌。主要分布在印度、巴基 一个属的 !##$% -/#.01., #%%-B 的序列，黑粉菌目 斯坦、伊朗、伊拉克、尼泊尔、阿富汗、巴西、墨西哥、 有玉米瘤黑粉菌 （ ） 20%#3. 4/(0 1X#%% +1OP ［，］ 美国和南非等地 $ 。长期以来小麦印度腥黑粉菌 的全序列，其和腥黑粉菌线粒体序列之间的相似性 因其检疫重要性一直是各国口岸检疫系统所关注的 不足’% [ ，根据线粒体基因片段设计QRS 引物直接 ［ ］ 有害生物$ ( ! 。该菌和近似种冬孢子之间的形态特 从总1OP 中扩增线粒体基因，不能得到预期的结 征非常相似，比如进境粮食类产品中常混杂的黑麦