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I型跨膜糖蛋白在砷中毒大鼠肾小球细胞表达
I型跨膜糖蛋白在砷中毒大鼠肾小球细胞表达
【摘要】 目的: 探讨I型跨膜糖蛋白(Fas)在砷中毒大鼠肾小球细胞表达的影响。方法: 复制砷中毒大鼠模型,测血砷、尿砷,免疫组织化学SABC方法检测肾小球细胞Fas的表达,并图像分析计数。结果: 慢性砷中毒高剂量组(25.6±3.99)和低剂量组(8.76±2.15)肾小球细胞Fas表达较对照组(1.30±1.57)明显增多,Plt;0.01。结论: 慢性砷中毒使肾小球细胞Fas表达明显增加,提示Fas可能参与慢性砷中毒肾小球细胞凋亡的调控。
【关键词】 砷中毒; 肾小球; 糖蛋白类; 肿瘤坏死因子; 大鼠,Sprague-Dawley; I型跨膜糖蛋白
[Abstract] Objective: To investigate Fas expression in renal glomerulus cells of chronic arsenic poisoned rats. Methods: Rats models of chronic arsenic poisoning were made by drinking AS2O3 water solution of high dosage (10 mg·kg-1·d-1) and low dosage (0.4 mg·kg-1·d-1) respectively.Contents of arsenic in blood and urine in rats were meaeured.The expression of Fas in the glomerulus cells was detected with immunohistochemistry method, and numbers of positive cells were counted through image pattern analysis. Results: The average Fas positive cell number in renal glomerulus of high-dose arsenic group (25.6±3.99) and low-dose arsenic group (8.76.±2.15 ) were much higher than that of control group (1.30±1.57)(Plt;0.01). Conclusions: Chronic arsenic poison obviously increase Fas expression in renal glomerulus cell, which suggests that Fas might participate the regulation of apoptosis of chronic arsenic poisoned renal glomerulus cell.
[Key words] arsenic poisoning; kidney glomerulus; glycoproteins; tumor necrosis factor; rats,Sprague-Dawley; transmembrane protein Ⅰ
砷可引起器官细胞凋亡已有报道,但砷中毒引起肾小球细胞凋亡少见报道[1~3]。2007-2008年通过建立大鼠亚慢性砷中毒模型,从砷中毒对肾脏损害的角度探讨Fas在细胞凋亡调控中的作用,为砷中毒发病机理和防治提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 动物分组及染毒
选择清洁级SD大鼠30只,体重为100~120 g,贵阳医学院动物实验中心提供,批号为SCXK(黔)2002-0001,随机分为3组,高剂量组、低剂量组、对照组,每组10只,雌雄各半,用三氧化二砷(AS2O3)溶于水中自由饮水染毒,(AS2O3由省公安厅审批,贵阳医学院设备处提供)。低剂量组(L组)AS2O3每天按0.4 mg/kg,高剂量组(H组)每天10 mg/kg。每周称体重,调节并维持给药量,连续染毒4个月。
1.2 砷中毒大鼠尿砷、血砷的测定
染毒结束后,采用代谢笼收集染毒大鼠的24 h尿液,股动脉取血并放血处死大鼠,测定前样品用浓酸氧化消化处理、碘化钾还原、去离子水定容,由贵阳医学院公共卫生学院检测中心采用“氢化物发生电感耦合等离子发射光谱法测定尿砷、血砷的含量。
1.3 取材制片及免疫组织化学染色
股动脉放血杀鼠,10%中性福尔马林心脏灌注固定。迅速取下右肾,10%中性福尔马林固定,常规石蜡包埋,连续切片4 μm,HE染色,免疫组织化学SABC法观察肾小球细胞Fas表达情况。试剂盒由武汉博士德生物有限公司提供,严格按试剂盒说明书操
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