基因组纯化之Thermo篇基于磁珠的基因组提取纯化系统-生物通.PDFVIP

基因组纯化之Thermo 篇 基于磁珠 的基因组提取纯化系统 赛默飞世尔科技推出的 Thermo Scientific KingFisher 磁珠纯化技术是新一代样品纯化技术，在 KingFisher 系统上利用转移磁珠的纯化方法，从普通样品如：血液、动植物组织、细菌、细胞、病毒； 以及疑难样品如：唾液、土壤、粪便、FFPE、法检等样品中，自动化快速提取高产量、高质量、高完 整度的DNA、RNA 样品。KingFisher 磁珠纯化技术及KingFisher 自动磁珠纯化仪，除了在核酸纯化领 域有卓越的表现外，作为开放的平台，根据试剂盒种类不同，KingFisher 也出色应用于蛋白质纯化、免 疫细胞分选、细菌富集等领域。 随着分子生物技术的发展，科研及临床检测要 离心到管底，从而缩短了离心时间，目前此方法仍 求的提高，核酸纯化方法也经历了密度梯度离心， 被部分实验室采用。 酚氯仿、苯酚、异戊醇抽提，二氧化硅吸附等化学 后来科学家将玻璃珠改成玻璃纤维，并将玻璃 物理方法。目前，基于硅胶膜对核酸特异结合的原 纤维制成薄膜状，置于离心管中层，用离心的方法 理所开发的方法已成为核酸纯化的主流方法。为了 从裂解液中吸附，这就是目前核酸纯化的主流方法 减少化学、物理因素对核酸的破坏和降解，科学家 --离心柱法。离心柱法极大简化了操作流程、缩短 们力求开发快速、温和的纯化方法，在确保遗传信 操作时间，目前已成为大多数实验室主流纯化方 息的完整性同时，提高工作效率。而 KingFisher 法；但离心柱法样品与硅介质结合时间短，样品回 磁珠纯化法不仅满足了科研工作者对核酸质量的 收率低，并对样品有一定的损伤。 高要求，同时其自动化、通量高、速度快、灵敏度 高的特性也提高了科研工作者的工作效率。目前转 移磁珠的磁珠纯化方案正在逐步替代以往的各种 方法，特别是目前普遍应用的离心柱法。 酚法抽提、玻璃珠沉淀法、离心柱法与磁珠法： 图1 基于离心法的核酸纯化 经典的核酸纯化法采用酚、氯仿抽提，样品经 以上提到的三种方法都是需要离心操作的纯 过处理后分为水相和有机相，通过酒精离心沉淀水 化方法（图1），每一批样品的提取都涉及到开关 相中核酸的方法纯化样品中的核酸，这就是我们所 离心管盖、废液处理、加液的操作，不仅引入了人 说的酚-率氯仿抽提法。酚法抽提相对稳定，至今 为误差，也容易在大批量样品处理时造成交叉污 仍被多数科技工作者广泛应用，也是其他多种提取 染。而应用磁珠纯化技术，则可以利用磁铁特异吸 方法的操作基础。 附磁珠（图 2A ），从而省去离心操作，减少人为 随后，科学家发现核酸与硅存在特异结合，并 操作环节，避免人为误差，不仅节省时间，同时使 开发了用玻璃珠吸附核酸，离心沉淀后经过洗和洗 高通量纯化成为可能。 脱得到纯化的核酸样品，因玻璃珠比重较大，容易 2011年6月24日第八十六期 第 12 页，共 41 页 下一页 返回