甲氧基乙氧基和羟丙氧基测定法操作规程.doc

甲氧基乙氧基和羟丙氧基测定法操作规程 1 目的： 建立甲氧基测定的标准操作程序。 2 范围： 本标准采用气相色谱法或容量法测定甲基纤维素、乙基纤维素或羟丙甲纤维素等药用辅料中所含的甲氧基、乙氧基和羟丙氧基。 3职责： 检验员、QC主任、品质保证部经理对本规程负责。 4 程序： 4.1 气相色谱法 4.1.1 测定原理：本法系利用供试品中的甲氧基（—OCH3）、乙氧基（—OCH2CH3）或（和）羟丙氧基（—OCH2CHOHCH3）与氢碘酸作用，生成易挥发的碘甲烷、碘乙烷或（和）2-碘丙烷，以正辛烷为内标，采用气相色谱法测定碘甲烷、碘乙烷或（和）2-碘丙烷的量，根据测定生成的碘甲烷、碘乙烷或（和）2-碘丙烷的量来计算供试品中甲氧基、乙氧基或（和）羟丙氧基含量。化学反应式如下： R—OCH3(R—OCH2CH3、R—OCH2CHOHCH3)+HI→ R—OH+CH3I(CH3CH2I、CH3CHICH3)、R—纤维素基团 4.1.2 仪器与试药 仪器 .1 气相色谱仪，带氢火焰离子化检测器或热导检测器。 .2 色谱柱 用25%苯基-75甲基聚硅氧烷，涂布浓度为20％的填充柱；或以6%氰丙基苯-94％二甲基硅氧烷（或极性相近）为固体液的毛细管柱。 .3 微量注射器 规格10μl和50μl。 .4 分析天平 感量0.1㎎和0.01㎎。 .5 加热器 加热温度150℃，控温精度±1℃；带孔：直径20㎜，深32㎜可振荡。 .6 反应瓶 外径20㎜，内径13㎜，高50㎜，带丁基橡胶塞，可密封。 试药 .1 碘甲烷、碘乙烷和2-碘丙烷，使用前进行标化测定（分析纯以上）。 .2 氢碘酸、已二酸、正辛烷和邻二甲苯，均为分析纯。 4.1.3 操作方法 内标溶液的制备 称取正辛烷0.5g ,置于100ml量瓶中，加邻二甲苯溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。 对照品溶液的制备 反应瓶中加已二酸80mg，分别精密加入内标溶液和57%氢碘酸各2ml，密封，精密称定；根据各供试品中所含甲氧基、乙氧基或（和）羟丙氧基的量，用注射器穿刺加适量的碘甲烷、碘乙烷或（和）2-碘丙烷，精密称定。两次称重结果相减即为对照品加入量；振摇30s，静置，取上层液体即得。 供试品溶液的制备 取供试品约65mg，精密称定，置已称重的反应瓶中，加己二酸80mg，分别精密加入内标溶液和57%氢碘酸各2ml，密封，称重，130~150℃振荡60 min，或在130~150℃加热30min，手工剧烈振摇5min，继续在130~150℃加热30min，冷却至室温，称重，若失重小于反应瓶中内容物的0.50%，且无渗漏，取混合液的上层液体作为供试品溶液；若失重大于反应瓶中内容物的0.50%，则应重新制备供试品溶液（羟丙甲纤维素的加热温度为150℃）。 系统适用性试验 将色谱柱接入气相色谱仪，选择适宜检测器，柱温采用程序升温：100℃，维持8min，然后以每分钟50℃的速率升温至230℃，维持2min，进样口温度为200℃；检测器温度为250℃。照气相色谱法测定，理论板数按正辛烷峰计算不低于1500（填充柱）或10000（毛细管柱），各对照品峰及内标物质峰的分离度应符合要求。取对照品溶液连续进样5次，校正因子相对标准偏差应不大于3.0% 校正因子测定 取对照品溶液1ul注入气相色谱仪，计算甲氧基、乙氧基或（和）羟丙氧基的校正因子?。 含量测定 取供试品溶液1ul进行测定，计算生成的碘甲烷、碘乙烷或（和）2-碘丙烷的量，折算成供试品中甲氧基、乙氧基和羟丙氧基的含量。 4.1.4 注意事项 碘甲烷、碘乙烷和2-碘丙烷均应避光保存，放置过程中释放出碘，使溶液颜色逐渐加深，含量降低，故每次测定前应进行标化测定，含量计算时应进行折算。 碘甲烷、碘乙烷和2-碘丙烷均为极易挥发性物质，应在进样前打开反应瓶密封盖，取上层液立即测定。 氢碘酸应为无色至微黄色液体，浓度应为57％，可直接从市场购买。如果氢碘酸颜色加深或浓度偏低，可取氢碘酸试剂置于全玻璃仪器中，加适量次亚磷酸，使氢碘酸的颜色由棕色变为无色，加热同时缓缓通入氮气，收集126~127℃的馏分，纯化后的氢碘酸贮存于有良好密封性的棕色玻璃瓶中，充氮保存，浓度约为57％。 反应条件对反应瓶的密封性要求苛刻，既要反应安全，又要防止渗漏，加热时间以60分钟为宜。 羟丙甲纤维素因分子结构位阻较大，加热温度需在150℃才能与氢碘酸反应完全，其余物质可控制加热温度为130~150℃。 碘甲烷、碘乙烷、2-丙烷和氢碘酸均为强刺激性物质，操作过程中应注意安全。 4.1.5 记录与计算 记录天平型号及室温和相对湿度，气相色谱仪型