增加规则重复序列对光滑鳖甲抗冻蛋白ApAFP914热-生物技术通报.PDF

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2017, 33 2 :185-191 增加规则重复序列对光滑鳖甲抗冻蛋白 ApAFP914 热滞活性的影响 王军  杜荣俸  刘忠渊  毛新芳 （新疆大学生命科学与技术学院 新疆生物资源基因工程重点实验室，乌鲁木齐 830046） 摘 要 ： 旨在探究光滑鳖甲抗冻蛋白ApAFP914 结构与热滞活性 （Thermal hysteresis activity，THA）的关系。采用基因合成 的方法，在光滑鳖甲抗冻蛋白基因ApAFP914 中增加单个规则重复序列并进行蛋白原核表达及热滞活性测定。结果显示，增加单 个重复序列的 - 为312 bp，融合蛋白TrxA-ApAFP-C914 经SDS及Western bolt 分析表明，分子量为34 kD。差示 ApAFP C914 扫描量热法 （Differential scanning calorimetry，DSC）测定表明，在50 μg/mL 的浓度下，增加单个重复序列显著提高了ApAFP 的 THA 活性。光滑鳖甲抗冻蛋白ApAFP914 增加一个重复序列可显著提高其热滞活性。 关键词 ： 抗冻蛋白 ；差式扫描量热法 ；重复序列 ；热滞活性 DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2017.02.027 Effect of Regular Repetitive Sequence on the Thermal Hysteresis Activity of Antifreeze Protein ApAFP914 in Anatolica polita WANG Jun DU Rong-feng LIU Zhong-yuan MAO Xin-fang （Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering ，College of Life Science and Technology ，Xinjiang University ， Urumqi 830046 ） Abstract: This work aims to explore the relationship between protein structure and thermal hysteresis activity of antifreeze protein ApAFP914 in Anatolica polita . A regular repetitive sequence was added in the ApAFP914 by gene synthesis. The synthesized gene was then expressed in prokaryotic cells and the thermal hysteresis activity of the protein was determined. Results showed that the gene - with ApAFP C914 a regular repetitive sequence added was 312 bp. The fusion protein TrxA-ApAFP-C914 was verified by S