外源bclΟ2基因和脂质体对鸡卵泡颗粒细胞体外-南京农业大学学报.PDF

南京农业大学学报 　2001 , 24 (2) : 75～78 　 Journal of Nanjing Agricultural University 外源 bcl2 基因和脂质体对鸡卵泡颗粒 细胞体外分裂和凋亡的影响 1 1 1 2 1 周东蕊 　杨利国 　姜勋平 　张书霞 　杨灿锋 (1 南京农业大学动物科技学院 ; 2 动物医学院 , 南京 210095) 摘要 : 选用正在产蛋的罗曼鸡 , 取其排序第 3 的卵泡分离颗粒层细胞 , 用含血清培养基培养 , 并用含脂质体每孔 00 , μ μ 06 , 12 , 24 , 48 L 和 bcl 2 基因重组质粒每孔 02 g 转染卵泡颗粒细胞。用流式细胞术等方法分析转基因后的原代 细胞和传代细胞的生长与凋亡情况。结果发现 , 与未转染组相比 , 转染后的传代细胞分裂速度较快 ( P 001 ) 、凋亡 比率较低, G / M + S 期细胞极显著高于对照 ( P 001 ) , 且与脂质体浓度有剂量依赖关系。在转染时间为 12 h 、DNA 2 μ μ 含量为每孔 02 g 的条件下 , 脂质体最佳转染浓度为每孔 12 L 。这些结果进一步证明 , 外源 bcl 2 基因或脂质体具有 促进细胞分裂 、抑制细胞凋亡、延长细胞寿命的作用。 关键词 : bcl 2 基因 ; 脂质体 ; 鸡 ; 卵泡颗粒细胞 中图分类号: S8311 ∶S852163 　　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : (2001) Effect of bcl2 gene and liposome on division and apoptosis of ovarian granular cells in laying hens 1 1 1 2 1 Zhou Dongrui , Yang Liguo , Jiang Xunping , Zhang Shuxia and Yang Canfeng (1College of Animal Science and Technology , 2College of Veterinary Medicine , Nanjing Agric Univ , Nanjing 210095 , China) Abstract : Granulosa cells were isolated from the follicles of each laying Romen hens and incubated in 2 mL of medium 199 supplementing with 5 % calf serum for 3 days , and then were transfected by bcl 2 gene using 00 , 06 , 12 , 24 and 48 μ