子宫颈鳞状上皮病变中HPV感染.PPT

病理新技术在子宫颈CIN的应用 河南省人民医院病理科 孔令非 病理学新技术 FISH 原位杂交 免疫组织化学 生物传感器 荧光原位杂交 Fluorescence in situ hybridization 原理 利用DNA碱基对的互补性，将直接标记了荧光的单 链DNA(探针)和与其互补的目标样本的DNA(玻片上 的标本)杂交,通过观察荧光信号在染色体上的位 置反映相应染色体的情况 FISH操作 FISH 探针种类 FISH检测在临床中的应用 产前诊断 血液病检测 实体瘤检测 端粒，端粒酶及作用 端粒是真核细胞染色体末端的特殊NDA-蛋白结构，其DNA含大量TTAGGG重复序列，在进化中高度保守 DNA酶不能复制线性DNA（端粒是线性DNA） 大多数体细胞的端粒会随周期性复制而缩短，最终达到一个使染色体完整性丧失的临界点，细胞增殖停止；许多肿瘤细胞端粒酶活性增高，是肿瘤细胞增殖的关键步骤 作用： 保护染色体基因组免受降解或重组 为染色体末端提供一种可消耗的非编码序列，以缓解或取消末端复制所带来的染色体DNA进行性缩短 生殖细胞具有端粒酶活性，其端粒不随年龄增加而缩短，故成为永生细胞 端粒酶由RNA，DNA及蛋白质组成，本质是一种逆转录酶 端粒酶活性决定于端粒酶RNA（human telomerase RNA, hTERC)和端粒酶催化亚单位(human telomerase reverse transcriptase, hTERT) hTERC是端粒长度稳定的直接因素 保持端粒稳定、基因组完整、细胞长期有活性和潜在的继续增殖能力 人端粒酶基因位于3q26.3，该基因的扩增可阻止细胞凋亡，导致肿瘤产生 中国8350例子宫颈病变TERC扩增 hTERC检测临床意义 伴有hTERC基因扩增的癌前病变的病人有52%－96%的恶变可能。 可预测CIN1/CIN2 向CIN3发展的风险因素，其灵敏度是100% ， 特异性是 70%. FISH是早期诊断和风险预测的有效手段 hTERC基因检测在宫颈癌和宫颈癌前病变诊断中有重要价值 魏丽惠，李亚里，吴瑞芳，陈忠，屠铮，江静，李静然 北京大学人民医院妇科，北京，中国 中国解放军总医院妇科，北京，中国 北京大学深圳医院妇产科，深圳，中国 犹他大学医学遗传学科，盐湖城，美国 该研究显示，采用FISH技术检测hTERC基因扩增可在宫颈细胞学玻片上进行，具有无创性和客观性的特点，敏感度和特异度高，在宫颈癌和宫颈癌前病变的诊断中有重要价值。hTERC基因的异常扩增可能成为宫颈病变恶性进展的早期标记物。 北京协和医院郎景和教授点评： 在液基细胞学检查和检测人乳头状瘤病毒筛查宫颈癌的同时，检测hTERC基因，有望成为协助宫颈癌和宫颈癌前病变诊断及预测癌前病变是否向子宫颈癌发展的重要指标，而造福广大妇女。 随着宫颈病变级别增加，hTERC的阳性率增加 hTERC阳性率 正常或炎症组 4.2-10.6% CIN1组 26.8% CIN2组 69.23% CIN3组 83.58% 宫颈癌组 95.65% 正常及CIN1的hTERC基因阳性率明显低于CIN2及以上者，P 0.01 hTERC诊断CIN2或CIN2以上病变 敏感度 81.40% 特异度 95.04% 阳性预测值 70.00% 阴性预测值 97.29% Human Papilloma Virus(HPV) 环状双链DNA病毒 超过120种亚型 其中的72种亚型可引起肛门及生殖器疾病 Low risk (LR-HPV): 6,11,40,42,44,54,61,70,72,81 High risk (HR-HPV): 1