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第1章 蛋白质化学3
;蛋白质 生物学功能 ★催化功能 — 酶,生物体内代谢反应的生物催化剂。 ★调节功能 ——代谢调节作用,动物的某些激素如胰岛素、生长素、促甲状腺激素、促卵泡激素等。★运输功能 —— 血红蛋白Hb (携氧)、脂蛋白运输脂类、葡萄糖转运蛋白等。★储存和营养功能 —— Mb(储氧)、酪蛋白、卵清蛋白等。 ★收缩和运动功能 ——肌肉中的肌蛋白、 肌球蛋白、鞭毛、纤毛蛋白等。;; ;分子病(molecular disease):由于基因结构改变,蛋白质一级结构中的关键氨基酸发生改变,从而导致蛋白质功能障碍,出现相应的临床症状,这类遗传性疾病称为分子病。
【经典举例】镰形细胞贫血症:编码珠蛋白β链的结构基因第六个密码子由CTT→CAT,(GAA-GUA),相应的多肽序列中N端的第六个氨基酸由Glu→Vla; 谷氨酸侧链带负电的羧基,缬氨酸侧链不带电荷的疏水基,降低溶解度,血红蛋白分子容易聚集成纤维状,使红细胞变形成成 杆状多聚体(镰形),输氧能力下降,细胞脆弱易溶血而引起贫血。; ; ; ;细胞色素c分子的空间结构;生物 与人不同的AA数目
黑猩猩 0
恒河猴 1
兔 9
袋鼠 10
牛、猪、羊、狗 11
马 12
鸡、火鸡 13
响尾蛇 14
海龟 15
金枪鱼 21
角饺 23
小蝇 25
蛾 31
小麦 35
粗早链孢霉 43
酵母 44
; ; ;
; ; ; ; ; ; 蛋白质两性解离性质和等电点; ; 蛋白质胶体性质; ; 如果加入适当的试剂使蛋白质分子处于等电点状态或失去水化层(消除相同电荷,除去水膜),蛋白质胶体溶液就不再稳定并将产生沉淀。 ;
;理化因素;核糖核酸酶变性与复性作用; 蛋白质变性与复性; ; ; ;测定范围:0.1~0.5mg/ml; ;双缩脲反应可检测蛋白质的水解程度; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ;基本策略:
片段重叠法+氨基酸顺序直测法
基本步骤:
(1) 多肽链的分离,测定蛋白质分子中多肽链数目(末端残基摩尔数蛋白质摩尔数比较);
(2)拆分蛋白质的多肽链,断开多肽链内二硫键;
(3)分析每一条多肽链的氨基酸组成(分子比和残基数目);
(4)鉴定多肽链N-末端、C-末端氨基酸残基;
(5)裂解多肽链成较小的片段;
(6)测定各肽段的氨基酸顺序;
(7)片段重叠法重建完整多肽链一级结构;
(8)确定半胱氨酸残基间形成二硫键交联桥的位置。;;多肽N、C-末端氨基酸的测定;Edman化学降解法;3、转化反应;丹磺酰氯(dansyl chlorid) 末端分析(DNS法);多肽链的部分裂解
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