第三章转录(RNA合成).ppt

; 现代分子生物学讲课内容 第一章 绪论 第二章 染色体与DNA 第三章 生物信息的传递（上）---从DNA到RNA 第四章 生物信息的传递（下）---从RNA到蛋白质 第五章 分子生物学研究方法（上）--DNA、RNA及蛋白质操作技术 第六章 分子生物学研究方法（下）--基因功能研究技术 第七章 基因的表达调控（上）-原核基因表达调控模式 第八章 基因的表达调控（下）-真核基因表达调控的一般规律 第九章 疾病与人类健康 第十章 基因与发育 第十一章 基因组与比较基因组学;目录;目录;第一节与转录有关的因素与条件;一.概述（前言） 1957年 Crick提出了中心法测(central dogma) DNA → RNA→ 蛋白质 1970 Crick又作了部分修改： DNA RNA 蛋白质;; 基因表达包括转录和翻译两个阶段 转录： 指拷贝出一条与DNA链序列完全相同（除了T→U之外）的RNA单链的过程。 ;复制和转录的异同点; 不同点： 复制 转录 模板 两股链均作为模板 模板链作为模板 原料 dNTP NTP 聚合酶 DNA聚合酶 RNA聚合酶 产物 子代DNA双链 mRNA;tRNA;rRN 配对 A-T；G-C A-U；T-A；G-C ★ 引物 需RNA引物 -------- ★方式(特点) 半保留复制 不对称转录;转录与复制的异同 ;模板链, 无意义链： 在DNA的两条多苷酸链中只有其中一条链作为模板。 编码链，有意义链: DNA双链中另一条不做为模板的链； 不对称转录： RNA的转录合成是以DNA的一条链为模板而进行的。;转录单元（transcription unit）： 一段从启动子开始至终止子结束的DNA序列。 RNA聚合酶从转录起点开始沿着模板前进，直到终止子为止，转录出一条RNA链。 ;转录起点: 是指与新生RNA链第一个核苷酸相对应DNA链上的碱基，研究证明通常为一个嘌呤 上游：把起点前面，即5‘末端的序列 下游：其后面即3‘末端的序列; 启动子： 指RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列。 终止子： DNA上与转录终止有关的序列。 增强子： 能使与其临近的基因转录频率明显增加的DNA序列。 转??因子 沉默子 ;模板链与非模板链; ;生物体内的3种RNA;转录的一般特点;二.酶;（一）原核生物RNA聚合酶;原核生物的RNA聚合酶;;;;核心酶 具有的四个功能位点 ;各亚基的功能 β亚基：由rpoB编码，结合底物（NTP及新生RNA链），进行聚合作用。 β′亚基：由rpoC编码，可能与模板结合。 α亚基：由rpoA编码，可能参与全酶的组装及全酶识别启动子，还参与RNA聚合酶与一些调控因子间的作用。 ω 亚基：约10KD,作为核心酶，具体功能不清楚。 σ亚基/?因子：使全酶识别启动子并与之结合，也看作一种辅助因子。;利福平和利福霉素可与b亚基结合，阻止RNA链的延伸，从而抑制转录的发生。;σ亚基/因子;σ亚基;大肠杆菌中的σ因子能识别并与启动子区的特异性序列相结合;σ?因子更替的现象 在细菌受到外界环境的急剧影响时，会改变所表达的基因，产生?因子更替的现象。 如环境温度升高时，大肠杆菌会开启rpoH基因的表达， 其产物?32能识别热激基因的启动子，而正常状态下表达的基因会关闭或表达水平下降。 芽孢菌生活周期过程中生活方式的改变也是通过?因子的更替完成的。;（二）真核生物RNA聚合酶;真核生物的RNA聚合酶 ;真核RNA-pol的的各种亚基电泳分离;◆按其对α-鹅膏蕈碱敏感性而分为三??； ◆均由10～12个大小不同的亚基所组成，结构非常复杂，其功能也不同。 ;;;真核RNA聚合酶的结构特点：;;羧基末端结构域 (carboxyl-terminal domain, CTD);某些常用的转录抑制剂;三.启动子;原核生物和真核生物 转录起始位点的结构差异;启动子;（一）原核生物启动子;原核生物启动子;大肠杆菌中部分启动子上的一致顺序;由含?70RNA多聚酶全酶识别的典型大肠杆菌启动子;1、起始位点（start point,起始子) 通常都是嘌呤碱基 (90%);1. -10序