第五章液相色谱11.ppt

第五章 高效液相色谱法 一、概论 一、液相色谱仪器 high performance liquid chromatograph 液相色谱仪（2） 液相色谱仪（3） 液相色谱仪（4） 二、高效液相色谱法的特点 feature of HPLC 三、流程及主要部件 process and main assembly of HPLC 2.主要部件 (2)梯度淋洗装置 (3) 进样装置 (4) 高效分离柱 (5) 液相色谱检测器 b. 光电二极管阵列检测器 光电二极管阵列检测器 c. 示差折光检测器（differential refractive index detector） 示差折光检测器 d. 荧光检测器（fluorescence detector） 一、 液-固吸附色谱liquid-solid adsorption chromatography 二、 液-液分配色谱liquid- liquid partition chromatography 三、 离子交换色谱ion-exchange chromatography 四、 离子色谱ion chromatography 五、 离子对色谱ion pair chromatography 一、液相色谱固定相 stationary phases of LC （3）化学键合固定相 化学键合固定相的特点 2.液-固吸附分离固定相 3.离子交换色谱分离固定相 4. 空间排阻分离固定相 二、液相色谱的流动相 mobile phases of LC 2. 流动相类别 3. 流动相选择 4. 选择流动相时应注意的几个问题 一、影响分离的因素 factors influenced separation 2.流速 二、分离类型选择 choice of separation types 三、 HPLC的应用 application of HPLC 2. 稠环芳烃的分析 四、制备型液相色谱 preparative liquid chromatography 2. 液相制备色谱的方法 3. 制备型液相色谱 离子色谱仪 一、离子色谱法原理 principle of IC 1.离子色谱法原理 2.离子色谱具有以下优点 二、离子色谱装置类型 suppressed apparatus of IC 离子色谱连续抑制装置图 离子色谱连续抑制原理图 三、离子色谱的应用 application of IC 一、超临界流体色谱的特点与原理principle and character of supercritical fluid chromatography 2. 超临界流体性质 3.原理 压力效应： 程序升压 HPLC与SFC比较 二、超临界流体色谱的结构与流程instrument structure and the general process of SFC 2.主要部件 主要部件 三、超临界流体色谱的应用 application of SFC 2.甘油三酸酯的分析 在选择溶剂时，溶剂的极性是选择的重要依据。 采用正相液-液分配分离时：首先选择中等极性溶剂，若组分的保留时间太短，降低溶剂极性，反之增加。 也可在低极性溶剂中，逐渐增加其中的极性溶剂，使保留时间缩短。 常用溶剂的极性顺序： 水(最大) 甲酰胺 乙腈 甲醇 乙醇 丙醇 丙酮 二氧六环 四氢呋喃 甲乙酮 正丁醇 乙酸乙酯 乙醚 异丙醚 二氯甲烷氯仿溴乙烷苯四氯化碳二硫化碳环己烷己烷煤油(最小) （1）尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。 （2）避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子。如使固定液溶解流失；酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。 （3）试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀并在柱中沉积。 （4）流动相同时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测器时，流动相不应有紫外吸收。 1. 影响分离的因素与提高柱效的途径 在高效液相色谱中, 液体的扩散系数仅为气体的万分之一，则速率方程中的分子扩散项B/U较小，可以忽略不计，即： H = A + C u 故液相色谱H-u曲线与气相色谱的形状不同，如图所示。 液体的黏度比气体大一百倍，密度为气体的一千倍，故降低传质阻力是提高柱效主要途径。 由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。 液相色谱中，不可能通过增加柱温来改善传质。恒温