糖化血红蛋白检测方法的标准化.ppt

糖化血红蛋白检测方法的标准化 主讲人：卢红 目录 ： Add Yur Title Add Your Title 电泳产物中存在异常的快速Hb 对47例糖尿病患者进行了三个月的研究 1968年发表文章 “糖尿病血红蛋白成分” 1969年研究发现， 快速泳动的Hb与HbA1c结构相同 糖化血红蛋白的发现过程.  Hb HbA ααββ HbA2 ααγγ HbF ααγγ HbA0 HbA1 HbA1b HbA1a HbA1c 97% 2.5% 0.5% 94% 6% 5% 地中海贫血的病人，HbF的含量升高，而HbA1c降低；这种情况应该检测总的糖化血红蛋白。 A1a和A1b浓度非常低 主要的糖化血红蛋白 已使用20年 根据DCCT研究确认 糖化和非糖化的血红蛋白 非糖化 糖化 血糖是通过弥散方式进入细胞内的，无需胰岛素参与。血糖与血红蛋白的结合过程很缓慢，而且是不可逆的，故体内衰老红细胞比新生红细胞的糖化HbA1c含量约高出1.5倍。 HbA1c是血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物 HbA1c越高表示血糖与血红蛋白结合越多，糖尿病病情也越重 HbA1c监测已作为糖尿病疗效判定和调整治疗方案的“金指标” HbA1c水平反映的是在检测前120天内的平均血糖水平，而与抽血时间，病人是否空腹，是否使用胰岛素等因素无关，是判定糖尿病长期控制的良好指标 HbA1c在患有各种贫血，出血性疾病或应用心得安，吗啡等药物时可降低，而在服用大量阿司匹林，维生素C或肾功能不全时可增高 第一PPT模板网，PPT素材下载 /sucai/ 寿命：120days 50%的HbA1c值与过去30天内的平均血糖水平相关 40%的HbA1c值与过去31--90天平均血糖水平相关 只有10%HbA1c与过去91--120天平均血糖水平相关 HbA1c形成的动力学 ADA（美国糖尿病学会）对HbA1c的定义 1.HbA1c对糖尿病的重大影响相当于胰岛素的问世 2.HbA1c是监测糖尿病血糖控制的金标准 3.所有的糖尿病人均应常规的测定HbA1c 4.对于血糖控制稳定者每年至少测定两次 5.对治疗方案变动者或血糖未达标者，则需季度监测 6.HbA1c的达标值ADA为7%，IDF(国际糖尿病联盟)西太区标准6.5% 上世纪80年代 检测技术进步 证据积累：糖尿病慢性并发症是慢性高血糖的结果 尿糖被毛细血管血糖检测取代 糖化血红蛋白成为常规监测的重要部分 糖尿病监测指标及其变迁 监测指标：尿糖，血糖，糖化血清蛋白及糖化血清白蛋白，糖化血红蛋白 糖尿病检查的项目选择 时间 是否空腹 抗凝剂的选择 样本稳定 重复性 尿糖 几小时后 否 无 几小时 差 随机血糖 取样时 否 草酸碱/氯化钠 几小时 差 空腹血糖 取样时 是 草酸碱/氯化钠 几小时 差 OGTT 取样时 第一次是 第二次否 草酸碱/氯化钠 几小时 差 糖化血清蛋白 1-3周 否 无 几天 可以 糖化白蛋白 2-3周 否 无 几天 可以 糖化血红蛋白 1-2个月 否 EDTA,肝素 草酸碱/氯化钠 两周以上 很好 诊断标准的变迁：1985年WHO的糖尿病诊断标准 符合下列之一者可诊断为糖尿病 注：若无糖尿病症状，尚需另有一次血糖超过11.1mol/l（200㎎/dl) 国际专家委员会建议的HbA1c诊断糖尿病的切点 HbA1c≥6.5%作为诊断非妊娠相关的糖尿病的切点 将HbA1c在≥6.0%和≤6.5%范围内的个体定义为“高危的亚糖尿病状态” 糖尿病的首选诊断标准 2009年美国糖尿病协会在糖尿病治疗指南中将HbA1c列为糖尿病的首选诊断标准。 HbA1c的常规测定方法 HbA1c常规测定方法： 易受以下多种因素的干扰 不稳定型HbA1HbF温度 价廉，操作快速 优点 缺点 1.阳离子交换树脂微柱层析法 综上表明：阳离子交换树脂法测定GHB不是一种精确，可靠，重复性强，灵敏度搞的检测方法。用作要求不太高的衡量糖尿病长期控制水平的监测指标，尚可勉强采用，而作为要求精确程度高的科研手段是困难的 HbA1c常规测定方法： 高压液相法（HPLC) 是目前各种GHB测定方法中高效，精确的方法之一 此种虽属理想的方法，但仪器价格十分昂贵，仅在一些发达国家使用 自1981年问世以来，很快受到学者们的重视，作为糖尿病理想的检测手段已获公认。目前我科也采用此种方法 原理：将血滴入反应试剂时，血红细胞被立刻溶解，所有血红蛋白随机被沉淀。硼酸结合物即可与糖化血红蛋白的顺式-二醇基结合。将反应物置于检测设备上，所有已沉淀的血红蛋白无论是否与硼酸结合，都将残留于滤网上，使用清洗液，出去多余有色结合物。最后使用NycoCard READERII检测仪对蓝色和红色的色谱进行分析。 亲和色谱微柱法 HbA1c常规测定方