现代色谱分析教案.doc

第一章 概论 第一节 色谱发展概况 色谱法简介: 1906年正式命名色谱法(Chromatography)Tswett应用吸附原理分离植物色素的新方法他把碳酸钙粉末放在一个长管的柱子中，把植物根茎叶的石油醚提取液从柱顶端倒人，然后用纯净的石油醚冲洗，结果各种成分按吸附序列不同分成具有不同颜色的谱带，然石按谱带的颜色进行鉴定分析。当时，Tswett把这种分离方法命名为色谱法。遗憾的是这一对科学事业作出的重要贡献，竟被遗忘了25年。 1941年，马丁和辛格（Martin and Synge）用成功的分离了氨基酸，建立了液液色谱分析方法，因此获得了1952年诺贝尔化学奖 1952年，马丁和辛格（Martin and Synge）创建了气液色谱法，提出了塔板理论 1957年，戈雷（Golya）发明毛细管GC柱 1959年，GPC色谱 1967年，HPLC 近年，毛细管电泳的兴起，为生物大分子的分离检测开辟了一条新途径。 第二节 GC与HPLC的比较 色谱的定义：利用不同物质在不同相（流动相，固定相）中的不同分配系数进行分离的方法叫色谱法。 按两相状态分： 第二节 GC与HPLC的比较 流动相 GC 用气体作流动相（载气有He,N2,H2）种类少 LC 用液体作流动相，对分离贡献大，种类多。 二.固定相 GC 有数百种GC固定相可供选择，种类多 LC 可选择不同流动相来改变分离选择性，因为固定相的种类少。 三.分析对象 GC 分离可挥发样品（沸点小于500OC） 四.检测技术 GC 常用检测器有TCD，FID，ECD，FPD。 FID 灵敏度很高，可检测限达ng级 LC 没有这么好的检测器，常用UV检测器 第三节 气相色谱文献 一、发表GC文献的主要期刊(安捷伦科技公司(中国安捷伦科技公司)) (瓦里安公司)(PE公司)(AOL公司)(分离科学，气相色Elsevier出版公司，Anal．Chim．Acta，J．Chromatogr．A，J．Chromatogr．B，Chromatographia等)(化学网站(气相) /chemsep(各种分离技术)(色谱理论)(气相色谱(毛细管气相色谱)(气相色) /homepage/strige/homepage.htm(色谱仪器) (色谱仪器) 色谱基本理论第一节 色谱图及基本参数 谱图：色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号对时间的曲线图，其纵标为信号强度(mv)，横坐标为保留时间(min)。 关术语： 色谱峰(Peak)：色谱柱流出组分通过检测器时产生的响应信号的微分曲线。 峰底(Peak Base)：峰的起点与终点之间连接的直线。 峰高h(Peak Height)：峰最大值到峰底的距离。 峰(底)宽W(Peak Width)：峰两侧拐点处所作切线与峰底相交两点之间的距离. 就是从色谱峰两侧的转折点(拐点)作切线，在基线上的截距叫峰底宽；简称峰宽；峰高一半处色谱峰的宽度叫半峰宽。由于色谱峰顶呈圆孤形，色谱峰的半峰宽并不等于峰底宽的一半 半(高)峰宽W1/2(Peak Width at Half Height)：通过峰高的中点作平行于峰的 直线，其与峰两侧相交两点之间的距离。 峰面积(Peak Area)：峰与峰底之间的面积，又称响应值。 标准偏差(σ)(Standard Error)：峰高的0.607倍处所对应峰宽的一半。 拖尾峰(Tailing Peak)：后沿较前沿平缓的不对称峰。 前伸峰(Leading Peak)：前沿较后沿平缓的不对称峰。 鬼峰(Ghost Peak)：不是试样所产生的峰，亦称假峰。 基线(Baseline)：在正常操作条件下,仅由流动相所产生的响应信号的曲线。 基线飘移(Baseline Drift)：基线随时间定向的缓慢变化。 基线噪声(N) (Baseline Noise)；由各种因素所引起的基线波动。 谱带扩展（Band Broadening） 保留值的基本参数 保留时间(tR)(Retention time)：组分从进样到出现峰最大值所需的时间。 死时间(tM)(Dead time)：不被固定相滞留的组分从进样到出现峰最大值所需的时间 调整保留时间(t’R )：tR’= tR-tM ，即扣除了死时间的保留时间。 校正保留时间（tRo）：tRo= j tR’ j为压力校正因子。 净保留时间(tN)：tN = j tR’ 经压力校正的调整保留时间。 死体积(VM)(Dead volume)：不被固定相滞留的组分，从进样到出现峰最大值所需的流动相体积 。 VM= tM Fc：即对应死时间的保留体积，Fc为色谱柱内载气平均流量。 保留体积(VR)(Retention volume)：组分从进样到出