实验二：果蝇地双因子实验.docVIP

实验二 果蝇的双因子实验 一：目的 1：掌握实验果蝇的杂交技术并学习记录交配结果和掌握统计处理方法 2：通过双因子杂交，验证和加深理解遗传学基本规律---------自由组合规律 3:验证两对非等位基因间的自由组合现象和遗传规律 二：原理 1）、黑腹果蝇 (Drosophila melanogaster) 是被人类研究得最彻底的生物之一。是一种原产于热带或亚热带的蝇种。它和人类一样分布于全世界各地，并且在人类的居室内过冬。 在遗传，发育，生理， 和行为等的研究方面，果蝇是最常见的研究对象之一。原因是它易于培养， 繁殖快，使用经济： 它在室温条件下， 十天就可以繁殖一代； 且只有四对染色体， 易于遗传操作； 还有它有很多突变体可以利用。 中文学名： 黑腹果蝇 拉丁学名： Drosophila melanogaster 别称： fruit fly 二名法： Drosophila melanogaster 界： 动物界 门： 节肢动物门Arthropoda 纲： 昆虫纲 Insecta 亚纲： 有翅亚纲 目： 双翅目 Diptera 亚目： 长角亚目、短角亚目 科： 果蝇科Drosophilidae 属： 果蝇属Drosophila 亚属： Sophophora 种： 果蝇 分布区域： 全球温带及热带气候区 果蝇又称小果蝇（Drosophilidae 科，Drosophila 属），英文全名 fruit fly。它和危害农作物的果实蝇（Trypetidae 科，Bactocera 属）不同，果实蝇危害瓜果类果实非常严重，是农业技术上的一大隐忧62种不同的气味受体蛋白用以检测和识别其所感受的所有化学气味分子[i03。黑腹果蝇对不同水果的嗜好程度差异的原因可能与不同水果挥发出的化学成分相关，水果中的何种化学气味成分在起关键作用有待于进一步研究。使用化学杀虫剂防治果蝇易增加果实中的农药残留，而且果蝇成虫个体小，危害隐蔽，发生时不易被察觉，成虫诱杀技术即成为果园果蝇防治的重要手段[1¨。明确果蝇对水果选择性的强弱也是进行农业和生物防治的重要基础和前提。已经证明，糖醋液、香蕉果肉和杨梅果实均对果蝇有显著的引诱效果[1 2|。利用这些技术，果农可以因地制宜地采取一些简易的手段监测果蝇发生及防治。因此，深入研究不同水果气味中引诱果蝇的活性成分，开发新型的果蝇成虫引诱剂，对降低葡萄的农药残留将具有重要的理论和实践意义。 2．1、生活周期的观察：果蝇是完全变态昆虫，生活周期可分为4个时期：卵、幼虫、蛹和成虫。最适培养温度20～25℃，温度越高，生长越快，但高于30℃不育甚至死亡。雌蝇可以一次产下400个0.5毫米大小的卵，它们有绒毛膜和一层卵黄膜包被。其发育速度受环境温度影响。在25环境下，22小时后幼虫就会破壳而出, 并且立刻觅食。因为母体会将它们放在腐烂的水果上或其他发酵的有机物上，所以它们的首要食物来源是使水果腐烂的微生物，如酵母和细菌，其次是含糖的水果。幼虫24小时后就会第一次蜕皮，并且不断生长，以到达第二幼体发育期。经过三个幼虫发育阶段和四天的蛹期，在25下过一天，就会发育为成虫。①卵 成熟的雌蝇交尾后（ 2 ～ 3d ）将卵产在培养基的表层。用解剖针的针尖在果蝇培养瓶内沿着培养基表面挑取一点培养基将其置于载玻片上，然后滴上 1 滴清水，用解剖针将培养基展开后放在显微镜低倍镜下仔细进行观察。果蝇的卵为椭圆形，长约 0.5mm ，腹面稍扁平，前端伸出的触丝可使卵附着在培养基表层而不陷入深层。 ②幼虫 果蝇的受精卵经过一天的发育即可孵化为幼儿虫。幼虫在培养基内及瓶壁上都有，培养基内的幼虫一般要小一些。这是因为果蝇的幼虫从一龄幼虫开始经两次蜕皮，形成二龄和三龄幼虫，随着发育而不断长大，三龄幼虫往往爬到瓶壁上来化蛹，其长度可达 4 ～ 5mm 。幼虫一端稍尖为头部，黑点处为口器。幼虫在培养基内和瓶壁上蠕动爬行。 ③蛹 幼虫经过 4 ～ 5d 的发育开始化蛹。一般附着在瓶壁上，颜色淡黄。随着发育的继续，蛹的颜色逐渐加深，最后为深褐色。在瓶壁上看到的几乎透明的蛹是已经羽化完而遗留的蛹的空壳。 ④成虫 刚羽化出的果蝇虫体较长，翅膀也没有完全展开，体表未完全几丁质化所以成半透明透乳白色。随着发育，身体颜色加深，体表完全几丁质化。羽化出的果蝇在 8 ～ 12h 后开始交配，成体果蝇在 25 ℃ 条件下的寿命为 37d 。 (1) 成虫习性: 黑腹果蝇成虫为舐吸式口器, 主要以舐吸水果汁液为食, 对发酵果汁和糖 醋液等有较强的趋向性[ 1] 。饲养观察结果显示成虫可存活25~ 40 d, 温度在8~ 33 ℃ 范围内 均可生存, 以25 ℃ 左右为最适宜[ 2] , 高于33℃ 时果蝇成虫陆续