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实验六 果蝇的单因子杂交实验 湖州师范学院 生命科学学院生物系 一、实验目的 1、通过实验深刻理解孟德尔分离定律 2、学习遗传学实验结果记录及统计处理方法 二、实验材料 五、实验步骤 1.选处女蝇:将旧瓶中的果蝇麻醉处死,在8h内收集处女蝇,雌、雄分开培养,可提前2-3天收集。 2.杂交:一组做正交、一组做反交各1瓶,麻醉、选取果蝇,每瓶放5对,确保杂交瓶中每只果蝇完全苏醒,没有死蝇。贴好标签,于25℃恒温箱培养。 3.处死亲本:7d后,处死杂交亲本。 4.观察F1:再过4-5天,F1成蝇出现,连续观察2—3天,或集中观察记录F1表型。 六、实验结果 1、观察并统计正、反交F1代表型及个体数,比较正、反交结果,分析基因间的显、隐性关系。 2、观察并统计正、反交F2代表型及个体数,计算不同表型个体数的比例,比较正、反交实验结果。 3、根据你的结果,对该实验F2代的统计结果作X2测验,填入表格。 六、实验结果 七、思考题 1.杂交实验中为什么亲本雌蝇要选用处女蝇? 2.在进行杂交和F1代自交后一定时间为什么要释放杂交亲本? 3.分析你的实验结果是否符合孟德尔分离定律。 * 《遗 传 学》校 级 精 品 课 程 * 《遗 传 学》校 级 精 品 课 程 野生型:长翅(+ / +) 突变型:残翅(vg / vg) 长翅果蝇:长翅座位是Ⅱ67.0,翅长超过尾部。长翅对残翅完全显性。 残翅果蝇:双翅几乎没有,只 有少量残痕,不能飞翔。 三、实验仪器设备 ※体视显微镜、恒温培养箱、培养瓶、麻醉瓶、毛笔、滤纸、培养皿。 ※ 乙醚、玉米粉、琼脂、红塘、酵母粉、丙酸等。 正 交 反 交 P: 长翅(♀)×残翅(♂) 残翅(♀)×长翅(♂) (+/+) (vg / vg) (vg / vg) (+/+) ↓ ↓ F1: 长翅 长翅 (+/ vg) (+/ vg) ↓ ↓ F2: 长翅 残翅 长翅 残翅 (+/+ +/vg)(vg / vg) (+/+ +/vg)(vg / vg) 1 : 2 : 1 1 : 2 : 1 单因子杂交是指一对等位基因间的杂交。 四、实验原理 ※一对杂合状态的等位基因,在遗传上保持相对的独立性,在配子形成时按原样分离到不同的配子中去,配子分离比为1:1,其自交后代中基因型分离比为1:2:1,表型分离比为3:1。 4.F1互交:选取正交、反交各5对F1果蝇,分别转入一新培养瓶(不需处女蝇),贴好标签,于25℃培养。 5.处死亲本:7d后,杀死F1代亲本果蝇。 6.观察F2:再过5d,F2成蝇出现,开始观察记录F2 ,连续统计7-8d。 注意:(统计过的果蝇放入酒精瓶中,杀死) 五、实验步骤 残翅数 长翅数 残翅数 长翅数 残翅(♀)×长翅(♂) 长翅(♀)×残翅(♂) 观察结果 统计日期 F1代: 合 计 残翅数 长翅数 残翅数 长翅数 残翅(♀)×长翅(♂) 长翅(♀)×残翅(♂) 观察结果 统计日期 F2代: 对F2代的统计结果做x2测验: (O-E)2/E 偏差(O-E) 预期数(E) 实际观察数(O) 总计 突变型 (正、反交合并) 野生型 (正、反交合并) 自由度=n-1= x2=∑(O-E)2/E= 六、实验结果 查x2表,进行差异显著水平检验 23.21 21.16 18.31 15.99 9.34 3.940 2.558 10 15.09
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