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pGEM-T载体
®
pGEM -T 和
pGEM®-T Easy 载体系统
原英文技术手册号码:TM042
产品 A1360 ,A1380 ,A3600 和 A3610 的操作指南。
所有技术资料均可在 网站上得到,
请访问公司网站以证实您所使用的技术手册为必威体育精装版版本
I. 描述…………………………………………………………………………………….. 2
II. 载体图谱……………………………………………………………………………….. 3
III. 产品组分…………………………………………………………………………….. 6
® ® 7
IV. 采用 pGEM -T 和 pGEM -T Easy 载体和 2 ×快速连接缓冲液进行连接……….
A. 操作步骤………………………………………………………………………… 7
® ® 7
V. 采用 pGEM -T 和 pGEM -T Easy 载体的连接反应产物的转化………………...
VI. 注意事项…………………………….………………………………………………. 8
A. PCR 产物纯度…………………………………………………………………... 8
B. 平端 PCR 产物………………………………………………………………… 9
C. 优化插入片段与载体的摩尔比………………………………………………… 10
D. 有插入片段的转化子的筛选…………………………………………………… 11
E. 实验对照………………………………………………………………………... 11
VII. 重组质粒 DNA 的提取…………………………………………………………….… 12
® ®
VIII. pGEM -T 和 pGEM -T Easy 载体单链 DNA 的制备….………………………… 12
IX. 疑难解答……………………………………………………………………………… 13
X. 参考文献……………………………………………………………………………… 15
XI. 附录A :载体序列及限制性酶切位点……………………………………………… 16
® 16
A. pGEM -T 载体序列………………………………………………………………
® 17
B. pGEM -T 载体限制性酶切位点…………………………………………………
® 18
C. pGEM -T Easy 载体序列……………………………………………………….
® 19
D. pGEM -T Easy 载体限制性酶切位点………………………………………….
XII. 附录 B:参考资料………………………………………………………………….. 21
A. 缓冲液及溶液配方……………………………
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