标记免疫地表面增强拉曼光谱研究.pdf

标记免疫的表面增强拉曼光谱研究 中文摘要 标记免疫的表面增强拉曼光谱研究 中文摘要 标记免疫技术是在免疫反应中加入标记示踪物，利用抗原一抗体结合反应的特异 性及各种标记物的可测量性来达到方便敏感地检测各种体内微量生物活性物质。随着 标记技术在免疫学中的应用，精密的物理化学手段引进到免疫学实验中，传统的拉曼 散射光谱信号较弱，作为信息读出手段往往缺乏高灵敏性。而表面增强拉曼散射 (SERS)可使信号增强6^-10个数量级。SERS标记免疫检测是一种将SERS与标记免 疫学相结合，利用SERS的高灵敏度和光谱选择性，结合抗体抗原的特异反应作用而 进行的纳米标记免疫分析技术。这种新发展起来的标记免疫分析技术将生物分析技 术、纳米技术与SERS三者很好的结合。 本论文对SERS标记免疫检测进行了较为系统的研究。研究基于类似三明治结构 的构建，对金属基底及纳米粒子进行抗体修饰，基底上的固相抗体与标记抗体通过与 抗原的结合形成 “固相抗体一待测抗原一标记抗体”夹心复合物，利用修饰抗体对抗 原的特异选择性识别及金纳米粒子与金属基底间的电磁祸合对拉曼散射的有效增强 效应，以标记物分子的表面增强拉曼信号间接表达抗体对抗原的识别作用。在横向上， 对基底修饰制备及再生性、标记分子选择、检测灵敏度提高等方面进行了研究，获得 了重要的突破进展，得到了详细的光谱信息，实验中极大地提高了抗原检测灵敏度， 并且通过探索合适的洗脱试剂进行基底再生，得到了较好的效果。在纵向方面，成功 地进行了单组分至多组分抗原的检测;通过不同光谱特征分子对不同免疫溶胶进行对 应标记，进而组装三明治结构，并进行了大量的对比实验，成功地进行了多组分抗原 的同时识别检测。 关键词:标记免疫检测;表面增强拉曼散射((SERS);三明治结构;检测限;多组 分;再生性 作 者:葛 明 指导老师:顾仁敖 SurafceEnhancedRamanspectroscopystudyofLabeledIninwnoassay SurfaceEnhancedRamanSpectroscopyStudyof LabeledImmunoassay Abstract Labeledimmnoassaytechniquecandetectbodys bythe measurabiliytofmarkerandthespecificity antigen/antibody.Alongwiththe applicationoflabellingtechniqueinimmun-ostudyexactmeasureofphysical v即a名 m toimmunoassay.TraditionalRamanscatteringsignalistooweaktobea goodinformationreadoutmeasure highsensibility.ButsurfaceenhancedRaman (SERS)canamp]海 thesignalbylargemagnitude.Labeledimmunoassayutilizing ，川far,-rn卜fm(哪 R hasthegreatselective妙andlowdetectionlimit.Thisnew wellcombinestan andSERS. developedlabeledimmunoassaytech响ue Thisprojectintendstodevelopanewtechnologyof